Caveolin-1在小鼠肝癌细胞Hepa1-6中的稳定表达及其对细胞生长的影响

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背景与目的胞膜窖(caveolae)是50~100 nm烧瓶状的细胞膜结构,和信号传导密切相关。窖蛋白-1(caveolin-1)是胞膜窖的主要结构成分,在细胞内吞、胆固醇运输、信号传导、肿瘤转化中发挥着重要的作用。研究表明,几乎所有正常细胞均有caveolin-1的表达,而在大多数肿瘤细胞如乳腺癌细胞和肺癌细胞中, caveolin-1表达下降或无表达,重新表达caveolin-1会抑制肿瘤细胞生长及肿瘤细胞集落的形成,反义核酸抑制caveolin-1表达则会增强细胞转化能力,提示caveolin-1可能具有抑瘤作用,因此caveolin-1基因被许多学者认为是候选的抑癌基因。然而近年研究表明,在前列腺癌细胞和膀胱癌细胞中caveolin-1高表达,而且表达水平与前列腺癌细胞和膀胱癌细胞细胞淋巴道转移潜能呈正相关;通过RNAi下调caveolin-1的表达能够抑制肿瘤细胞的生长、转化及转移能力,因此caveolin-1还被认为是淋巴道转移相关基因。所以,深入研究caveolin-1在不同肿瘤细胞中的作用有重要的意义。目前,有关caveolin-1和肝癌转移方面的报道很少。本课题组前期工作表明,在HCa-F(高淋巴道转移株)中caveolin-1表达量高于HCa-P(低淋巴道转移株)和Hepa 1-6 (无淋巴道转移),在Hepa 1-6细胞中没有检测到caveolin-1的表达,提示caveolin-1在小鼠肝癌细胞淋巴道转移中发挥作用。本文旨在通过克隆小鼠caveolin-1cDNA、构建其表达载体并将其稳定表达于小鼠肝癌细胞Hepa1-6中,观察Hepa1-6细胞生物学的变化,为进一步研究caveolin-1在小鼠肝癌细胞淋巴道转移中发挥作用提供实验基础。方法1.从小鼠肺组织中提取总RNA,利用caveolin-1特异性引物经
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