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膜转运蛋白PepT1是研究最为广泛的一种小肽转运蛋白，主要跨膜转运二肽和三肽。本研究以普通鲤鱼（Cyprinus carpio L.）为研究对象，采用Real time-PCR、SDS-PAGE等分子生物学和生物化学技术，克隆了鲤鱼肠道小肽转运载体PepT1基因的全长cDNA，构建了重组表达载体pET-32a(+)-PepT1，表达具有免疫原性的基因片段，制备出了PepT1抗血清，并应用ELISA及免疫组化等免疫学技术分析了PepT1蛋白在鲤鱼不同组织中的表达规律。同时，采用实时定量PCR技术，探讨了PepT1基因在鲤鱼不同组织中的表达差异，以及寡肽对PepT1基因表达的调节作用。主要研究结果如下:
1、重组表达了具有免疫原性的多肽。以鲤鱼肠道为材料，克隆PepTI基因开放阅读框的序列全长，选取pET-32a(+)为表达载体，引入BamHI和EcoRI限制性酶切位点，将编码66个氨基酸、具有PepTI免疫原性的片段(198bp)连接至pET-32a(+) Vector上，经筛选获得阳性重组载体pET-32a(+)-PepT1;将阳性重组载体转化至大肠杆菌Rosetta中，构建重组基因工程菌。经1‰IPTG诱导，基因工程菌成功表达了具有PepT1免疫原性的片段。经SDS-PAGE电泳分析，结果显示:目的多肽分子量约为28kDa。
2、PepT1抗体制备。以工程菌表达且经过纯化的多肽为抗原，加入完全弗氏佐剂及不完全弗氏佐剂充分乳化，采用耳缘静脉结合皮下注射法，免疫新西兰兔。先后免疫4次，总时长为38d。成功获得鲤鱼PepT1抗血清，ELISA检测效价为4×105。
3、PepT1组织分布研究。利用获得的PepT1抗血清，通过免疫组织化学方法，对PepT1蛋白在鲤鱼肠道、肾脏、脾脏及肝胰腺等组织中的表达定位进行研究。结果显示，PepT1蛋白在鲤鱼的前肠、中肠、后肠、脾脏、肝胰脏和肾脏均有表达。采用Real time-PCR，对鲤鱼8个组织（前肠、中肠、后肠、肝胰脏、脾脏、心脏、肾脏、鳃）的PepT1 mRNA表达水平进行了定量研究。
4、鲤鱼PepT1基因相对表达丰度对不同浓度寡肽的响应。在基础饲料中分别添加5％、10％、15％的“维他快”（华达生化科技饲料有限公司出品，寡肽含量为49％）饲喂实验鱼，结果显示，PepT1 mRNA的表达量随着寡肽添加量的升高而呈现正响应，其中，中肠PepT1 mRNA表达量随寡肽梯度呈现显著性变化。