【摘 要】
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该研究以马铃薯Y病毒(中国流行株系)基因组RNA的cDNA为模板,通过聚合酶链式反应合成和改造了病毒的外壳蛋白基因(CP)和复制酶基因(NIb).在CP基因起始密码子后增加一个核甘酸
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该研究以马铃薯Y病毒(中国流行株系)基因组RNA的cDNA为模板,通过聚合酶链式反应合成和改造了病毒的外壳蛋白基因(CP)和复制酶基因(NIb).在CP基因起始密码子后增加一个核甘酸碱基造成移码突变,使其产生非翻译mRNA;将复制酶基因5端的376个核苷酸碱基缺失后也造成移码突变,在植物体内不能翻译出复制酶蛋白.将改造好的CP及NIb基因分别正向插入到pBI121的原GUS基因位点内,置于35S启动子下,得到植物表达载体pYUCP和pYTR;采用类似的方法将两个CP基因及两个NIb基因顺式相连后(衔接重复),再插入到pBI121的原GUS位点内,分别受各自的35S启动子操纵,得到双价植物表达载体pYRCP.实验亦表明,对于马铃薯Y病毒的病原介导的抗性是一种RNA介导的抗性,其机制可能符合基因沉默的机制;然而,在转基因的拷贝数与其介导的抗性程度之间,没有直接的相关性,但转基因的构建方式对于获得的抗性程度却极为重要.
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