【摘 要】
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平邑甜茶(Malus hupehensis(Pamp) Rehd.varpinyiensis Jiang)是我国特有的植物资源，常用作苹果和观赏海棠的砧木。本研究以平邑甜茶为试材，克隆了MhBAG，MhDAD和MhHSP70基因的全
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平邑甜茶(Malus hupehensis(Pamp) Rehd.varpinyiensis Jiang)是我国特有的植物资源，常用作苹果和观赏海棠的砧木。本研究以平邑甜茶为试材，克隆了MhBAG，MhDAD和MhHSP70基因的全长cDNA序列，并运用生物信息学手段分析了其基因序列与编码蛋白的性质和功能；同时，研究了它们在重金属、盐及干旱胁迫下的表达情况，并对细胞凋亡率进行了测定。成功构建了MhBAG，MhDAD基因正反义表达载体并转化拟南芥，获得转基因拟南芥植株。主要结果如下：
1)获得了平邑甜茶MhBAG基因，该基因cDNA全长1841bp，含有1017的完整开放阅读框，编码338个氨基酸，GenBank登录号为HQ639935。
2)获得了平邑甜茶MhDAD基因，该基因cDNA全长546bp，含有360的完整开放阅读框，编码119个氨基酸，GenBank登录号为JN390964。
3)获得了平邑甜茶MhHSP70基因，该基因cDNA全长2307bp，含有1953的完整开放阅读框，编码650个氨基酸，GenBank登录号为HQ876864。
4)半定量RT-PCR结果表明，在硫酸镉胁迫、盐胁迫以及干旱胁迫下，随胁迫程度的加剧，MhBAG、MhDAD的表达量逐渐下降，MhHSP70的表达量则呈现上升趋势，测定细胞凋亡率亦逐渐增加。
5)构建了pET-30a-MhBAG原核表达载体，进行了原核表达实验，测定MhBAG蛋白大小为37kD。
6)构建了pBI121-MhBAG正反义表达载体，并通过花序侵染法转化拟南芥，通过抗性筛选和PCR检测，得到转基因再生阳性植株。
7)构建了pBI121-MhDAD正反义表达载体，并通过花序侵染法转化拟南芥，获得T0代种子。
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