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目的：探讨microRNA-1(miR-1)在心力衰竭过程中的作用及其分子机制。 方法：1、利用心脏特异性启动子α-肌球蛋白重链(α-MHC)，建立miR-1过表达的转基因小鼠(Tg)模型。2、应用心电监测、电镜扫描和Western blot等方法证实miR-1过表达小鼠模型建立成功。3、心功检测miR-1转基因小鼠心脏收缩和舒张参数的变化。4、HE染色和电镜扫描，检测miR-1转基因小鼠心脏结构的改变。5、应用Real-time PCR和Western blot技术，检测miR-1转基因小鼠心脏中与肌节收缩相关蛋白的改变。6、应用荧光素酶双报告基因技术检测miR-1与MYLK3(编码cMLCK蛋白)和CALM1、CALM2(编码CaM蛋白)的靶向性调节作用。7、应用Western Blot技术检测转染外源性miR-1的原代乳鼠心肌细胞(NRVCs)中靶蛋白cMLCK和CaM的表达水平以及相关收缩蛋白的表达。 结果：1、Real-time PCR结果显示：Tg小鼠心脏中miR-1的表达量随年龄增长而增加。4个月时，表达量是WT小鼠的3倍，具有心脏特异性。2、心电结果显示：与年龄匹配的WT小鼠相比，4个月和6个月的Tg小鼠QRS波群加宽，P-R间期延长。电镜结果显示：4个月和6个月的Tg小鼠心脏闰盘出现严重溶解。Western Blot结果显示：4个月和6个月的Tg小鼠connexin43蛋白的表达明显减少，具有显著差异(p<0.05)。3、心功结果显示：4个月、6个月的Tg小鼠出现心脏功能障碍，表现为射血分数(EF％)、左室内压最大变化速率(±dp/dt)、收缩末期压力(ESP)、前负荷充盈性搏功(PRSW)的下降和舒张末期容积(EDP)等参数的增加。4、HE染色结果显示：与WT小鼠相比，4个月和6个月Tg小鼠心脏体重比增加，但没有出现心肌肥大。电镜结果显示：Tg小鼠肌节缩短，肌丝亮带和H带消失，6个月时心肌细胞出现严重的溶解。5、Westernblot结果显示：Tg小鼠心脏中p-MLC2v和p-cMyBP-C蛋白表达减少，进而发现cMLCK、p-CaMKⅡ和CaM的表达受到抑制。而cMLCK和CaM的mRNA水平不变，说明可能存在转录后抑制。6、荧光素酶双报告基因技术分析，证实miR-1对MYLK3、CALM1和CALM2的3’UTR有靶向性抑制作用。7、在原代培养的乳鼠心室肌细胞，转染外源性miR-1导致CaM，cMLCK蛋白表达量的下降，进而抑制p-MLC2v、p-cMyBP-C和p-CaMKⅡ蛋白的表达。 结论：miR-1能够通过靶向作用MYLK3、CALM1和CALM2，对eMLCK和CaM产生转录后抑制，进而引起p-MLC2v、p-CaMKⅡ和p-cMyBP-C蛋白表达的减少，使肌节结构发生改变。肌节结构的改变导致不利的心脏重构，引起收缩和舒张功能障碍，甚至引发心力衰竭。本实验首次证明miR-1通过改变心脏关键收缩蛋白的表达诱发不利的心肌重构。