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蠲痹历节清方临床可用于治疗和缓解痛风及其引起的急性痛风性关节炎,临床观察和动物实验表明,具有良好的抗炎镇痛效果,本实验遵照这一思路思想设计,在镇痛实验中选用不同镇痛模型考察研究蠲痹历节清方镇痛效果及其作用机制;以蠲痹历节清方做为观察主体,相关炎症因子为切入点,对急性痛风性关节炎模型进行药物干预,深入研究蠲痹历节清方对急性痛风性关节炎作用机理,从而为临床应用提供科学的理论基础和实验依据。目的:1.通过不同镇痛实验检验蠲痹历节清方镇痛效果,并研究其相关镇痛机理。2.研究蠲痹历节清方抗痛风性关节炎作用,并且探讨其抗痛风性关节炎部分作用机制。方法:1、镇痛实验采用热板法和醋酸扭体法观察蠲痹历节清方镇痛效果,选用雌性小鼠模型,给予蠲痹历节清方低中高不同剂量灌胃,观察动物热板法实验中痛阈变化;醋酸扭体实验中,观察小鼠扭体次数及其药物对小鼠扭体抑制率,并且检测实验动物中血清中前列腺素E2(PGE2)和一氧化氮(NO)含量,通过与阳性对照药物双氯芬酸钠进行对比,验证蠲痹历节清方镇痛效果及探讨其相关镇痛作用机制。2.干预急性痛风性关节炎症模型:将实验大鼠60只,分为A、B、C、D、E、F共6组,每组10只。A代表正常对照组;B代表模型组;C、D、E代表蠲痹历节清方高、中、低剂量组;F代表阳性药物依托考昔治疗组;建立大鼠膝关节痛风性关节炎模型,用蠲痹历节清方进行干预,以依托考昔作为对照药物进行对照,分别干预48h,分别于造模后即刻、造模后4h、12h、24h、48h观察大鼠膝关节炎症指数、测量大鼠膝关节周径以观察膝关节肿胀度改变情况、观察大鼠膝关节关节液中白细胞计数、ELISA检测大鼠膝关节关节液炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的含量。结果:1.在镇痛实验:(1)扭体法:蠲痹历节清方各剂量组能显减少各组小鼠扭体次数,提高扭体抑制率,同空白对照组比较有显著性差异,存在量效关系;蠲痹历节清方各剂量组能降低血清PGE2、NO水平,其中中药高中低剂量组组间对比,高剂量组镇痛效果明显。(2)热板实验:各给药剂量组均能延长小鼠舔足潜伏期,提高小鼠痛阈,高于空白对照组,其中末次给药90min、120min后,高低剂量组对比差异明显,随着药物剂量的增加,镇痛效果明显,存在着一定的量效关系。2.干预急性痛风性关节炎症模型中,蠲痹历节清方能有效改善大鼠实验性痛风性关节炎模型一般情况,降低大鼠实验性痛风性关节炎模型关节炎症指数、关节肿胀度,各用药组组同模型对照组比较,用药后12h.24h、48h关节炎指数、关节肿胀度不同程度降低,其中中药高剂量组改善关节炎症指数,降低关节肿胀度最明显。蠲痹历节清方能降低关节液中白细胞计数,同模型组对比差异明显,高中低剂量组中高剂量组降低明显。蠲痹历节清方能有效对关节炎中TNF-α、IL-6、IL-1β表达的产生影响,能抑制这些细胞炎症因子在膝关节关节液中的含量,同模型对照组对比差异明显,高剂量组抑制明显。结论:1.镇痛实验中蠲痹历节清方能延长热板法实验中小鼠的舔足潜伏期,提高热板法中小鼠痛阈水平;蠲痹历节清方能够减少醋酸致小鼠扭体实验中小鼠扭体次数,提高扭体抑制率,以上表明蠲痹历节清方具有良好的镇痛效果,并且其作用机制可能抑制疼痛炎症因子PGE2、NO表达水平有关,且中药复方存在量效关系。2.蠲痹历节清方能有效降低大鼠实验性痛风性关节炎模型关节炎症指数、关节肿胀水平,降低实验性痛风性关节炎大鼠关节液中白细胞计数水平,并对TNF-α、IL-6、IL-1β表达的产生影响,能抑制这些细胞因子在膝关节腔关节液中的含量,从而抑制炎症反应。以上研究为清热利湿散瘀止痛中药蠲痹历节清方治疗痛风性关节炎提供实验依据,同时也为开发新的痛风性关节炎中药提供了重要的科学依据和研究思路。