【摘 要】
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为了探讨氟化物对机体骨骼代谢的影响与核因子-KB受体活化因子配体(RANKL)的关系，本研究采取完全消化法，以胎羊(2-3月龄)头盖骨为材料分离成骨细胞，通过形态观察(Giemsa染色)、A
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为了探讨氟化物对机体骨骼代谢的影响与核因子-KB受体活化因子配体(RANKL)的关系，本研究采取完全消化法，以胎羊(2-3月龄)头盖骨为材料分离成骨细胞，通过形态观察(Giemsa染色)、ALP和钙化结节染色来鉴定细胞，并进行传代培养；从体外培养的成骨细胞中提取总RNA，经RT-PCR扩增出RANKL cDNA序列，经粗略测序后进行同源性分析，确定为目的基因序列；利用半定量RT-PCR来检测，同一时间(6d)、不同浓度(0、10<-6>、10<-5>、10<-4>、5×10<-4>mol/L)NaF和不同时间(2d、4d、6d、12d)、同一浓度(0、5×10<-4>mol/L)NaF，对体外培养绵羊成骨细胞RANKL基因表达的影响。结果表明：
1．不同浓度NaF均能刺激体外培养成骨细胞RANKL基因的表达，且呈剂量依赖关系，当NaF浓度为10<-5>mol/L和5×10<-4>mol/L时RANKL基因表达量的增加最为明显，与对照组比较(P<0.01)。
2．成骨细胞分泌RANKL mRNA的量在第6d达到高峰，之后至12d仍有RANKL mRNA的表达，但表达量较第6d已有明显的下降。
3．在各个时间段，5×10<-4>mol/LNaF组：RANKL mRNA的表达均较空白对照组高，且第6d和12d较对照组有明显增高(P<0.01)，第4d较对照组也有明显增高(P<0.05)。
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