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本文以单宁酸为试验材料,研究了单宁酸对瘤胃体外发酵和甲烷产量的影响。通过对瘤胃体外发酵系统中单宁酸的生物降解以及对瘤胃内环境影响的研究,初步确立了单宁酸改善瘤胃发酵的适宜添加量及其效果;并探讨了在不同精粗比底物条件下单宁酸对瘤胃体外发酵和甲烷产量的作用。主要研究结果如下:1.建立了毛细管气相色谱测定瘤胃体外发酵产物中甲烷和挥发性脂肪酸的方法和条件。以高纯氮气作为载气,用氢火焰离子化检测器,用AT SE-30毛细管柱(30m×0.32mm×0.53um)和ZB-FFAP(7GH-G009-11)毛细管柱(30m×0.25mm×0.25um),通过对载气压力及流速、柱温、汽化室和检测室温度等一系列条件的摸索,可在4.5 min之内快速准确的测定瘤胃发酵液中乙、丙和丁酸的含量;甲烷的保留时间为0.43 min。2.采用薄层层析法对单宁酸的生物降解产物进行了研究。在此培养系统中,瘤胃培养液为30 ml(含单宁酸0.1%),试验分两个处理,在100 ml 39℃预热的培养管内,一组添加淀粉2 mg/ml瘤胃液作为能量来源,另一组不添加,每个处理三个重复,同时设一个空白对照组,另一个平行对照组加入高压处理过的瘤胃液。体外培养72 h后,对于添加单宁酸的处理组体外产气量和氨的浓度降低。除对照组和对照组+单宁酸在24 h外,随着氨氮浓度的降低,产气量却逐渐增加,在24 h发酵后更加明显。对添加单宁酸的瘤胃液厌氧培养的结果用运层析色谱法分析表明,五倍子酸和焦棓酸在24 h发酵后的瘤胃培养液中被检测到。五倍子酸和单宁酸在体外培养48 h和72 h的瘤胃液中没有检测到,焦棓酸和间苯二酚是可以检测到的唯一代谢产物。在添加单宁酸的高压蒸气处理过的瘤胃液中没有发现其任何代谢产物。3.采用Menke的Syringe体外培养系统研究单宁酸对瘤胃发酵和甲烷产量的影响。试验设四个处理,单宁酸的添加量分别为4、6、8和10 mg,每个处理三个重复,同时设一个空白对照组。体外培养24 h后,各处理组比对照组分别增加了3.4%,5.0%,10.1%和13.2%;试验组的甲烷产量均比对照组有所降低;处理组氨氮浓度显著低于对照组(p<0.01),分别比对照组降低了8.7%、19.6%、16.7%和25.1%,而微生物蛋白的产量却显著升高(p<0.01)。在以黑麦草为底物的Syringe的系统中,单宁酸的适宜添加量为6～10 mg,即0.2～0.4 mg/ml瘤胃液。4.研究不同精粗比底物条件下单宁酸对瘤胃发酵和甲烷产量的影响。对以粗料为主的底物,添加单宁酸可以提高体外产气量,而当底物中精料比例大于50%时,单宁酸会