论文部分内容阅读
目的：
观察葛根总黄酮经鼻给药对偏头痛模型动物的主要药效学作用及其机制。探讨经鼻给药制剂的特点。
方法：
采用大鼠大脑中动脉线栓法(MCAO)造成脑缺血再灌注损伤模型,实验设MCAO模型对照组、不同给药途径的给药组,分别为:MCAO模型组给予等容量氯化钠溶液滴鼻给药、滴鼻给药组给予葛根总黄酮150mg/kg、十二指肠给药组给予150mg/kg葛根总黄酮和腹腔注射给药组给予葛根素注射液80mg/kg,另设假手术阴性对照组。给药后观察药物对大鼠脑血流量、脑组织梗死体积和神经功能损伤的影响；
采用皮下注射硝酸甘油的大鼠偏头痛模型,实验设阴性对照组、模型对照组、阳性药对照组和给药组。阴性对照组和模型对照组均滴鼻给予等容量纯化水、阳性对照组口服灌胃麦角胺咖啡因2mg/kg,给药组分别滴鼻给予141mg/kg、94mg/kg的葛根总黄酮以及口服灌胃800mg/kg的葛根总黄酮。给药后观察药物对血液中一氧化氮合酶含量的影响。
采用皮下注射利血平造成递质耗竭致大鼠偏头痛模型,实验设阴性对照组、模型对照组、阳性药对照组和葛根总黄酮给药组。阴性对照组和模型对照组均滴鼻给予等容量纯化水,阳性药对照组口服灌胃麦角胺咖啡因2mg/kg,葛根总黄酮给药组分别滴鼻给予113mg/kg、75mg/kg、37mg/kg的葛根总黄酮。观察给药后大鼠脑内去甲肾上腺素、多巴胺、高香草酸、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸等神经递质水平的变化及大鼠血液中一氧化氮合酶含量的变化。
采用大鼠戊巴比妥钠阈下睡眠剂量实验,大鼠延长戊巴比妥钠睡眠时间实验,观察滴鼻给予葛根总黄酮对镇静作用的影响。实验设阴性对照组、阳性药对照组和给药组。阴性对照组滴鼻给予等容量纯化水,阳性对照组口服灌胃2mg/kg地西泮溶液。给药组滴鼻给予75mg/kg、50mg/kg的葛根总黄酮,以及口服灌胃给予葛根总黄酮48mg/kg. 采用大鼠甩尾法观察葛根总黄酮的镇痛作用,实验设阴性对照组、阳性药对照组和给药组。阴性对照组滴鼻给予等容量纯化水,阳性药对照组口服灌胃盐酸曲马多67mg/kg,给药组滴鼻给予75mg/kg、50mg/kg的葛根总黄酮。
观察葛根总黄酮对大鼠的鼻粘膜急性刺激作用,实验设阴性对照组和给药组。阴性对照组滴鼻给予等容量氯化钠溶液,给药组滴鼻给予235mg/kg的葛根总黄酮溶液。
结果：
1.给药后,葛根总黄酮各给药组的脑血流灌注单位(PU)明显增加,与MCAO组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。运动血细胞浓度(CMBC)十二指肠组给药组与MCAO组有显著性差异(P<0.05),滴鼻给药组与模型组比较虽无显著性差异,但CMBC上升明显。各给药组的流速(V)值变化不明显。
葛根总黄酮各给药组神经功能缺损程度评分降低,与MCAO比较有显著性差异(P<0.05)。各给药组脑梗死体积显著缩小,与MCAO组比较有非常显著性差异(P<0.01)。
2.滴鼻给予不同剂量的葛根总黄酮能明显提高利血平致偏头痛模型动物脑内去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)的含量,与模型对照组相比均有显著性差异(P<0.05)。麦角胺咖啡因可明显提高模型动物脑内DA含量；
给予葛根总黄酮或麦角胺咖啡因后,大鼠血液中的一氧化氮合酶(NOS)水平显著降低,与模型对照组相比有显著性差异(P<0.01)。
3.硝酸甘油造模后30min大鼠出现倦卧、双耳发红现象,前肢挠头、后肢挠头、甩头等典型症状,模型组的脑内和血液中NOS水平显著升高,与阴性对照组相比有显著性差异(P<0.01)。
滴鼻给药和灌胃给药以及麦角胺咖啡因口服灌胃都能明显减少硝酸甘油致偏头痛模型大鼠的前肢挠头次数,与模型组相比,有显著性差异(P<0.05)。
滴鼻给予葛根总黄酮后,血液NOS水平显著降低,与模型对照组相比有显著性差异(P<0.01);口服灌胃麦角胺咖啡因血液内NOS有下降的趋势。口服灌胃葛根总黄酮血液内NOS没有明显变化。
滴鼻给予葛根总黄酮后,脑组织内的NOS水平显著降低,与模型对照组相比有非常显著性差异(P<0.01)。葛根总黄酮口服和麦角胺咖啡因口服后脑组织内的NOS水平亦明显下降,与模型对照组相比有显著性差异(P<0.05)。
4.滴鼻给予葛根总黄酮可明显增加阈下剂量戊巴比妥钠所致入睡动物数,与阴性对照组相比有非常显著性差异(P<0.01);对戊巴比妥钠所致动物睡眠时间的影响与阴性对照组相比无显著性差异,但小剂量有缩短大鼠入睡潜伏期的趋势。口服灌胃葛根总黄酮后亦可明显增加阈下剂量戊巴比妥钠所致入睡动物数,与阴性对照组相比,有显著性差异(P<0.05)。
5.滴鼻给予葛根总黄酮无明显镇痛作用。
6.葛根总黄酮滴鼻给药对大鼠鼻粘膜无明显的急性刺激作用。
结论：葛根总黄酮滴鼻给药可以明显改善脑缺血再灌注大鼠的脑血流水平,减少脑组织损伤,作用较腹腔给药和十二指肠给药显效快,在给药早期作用较腹腔和十二指肠给药更强,显示了滴鼻给药的特点与优势；
葛根总黄酮滴鼻给药能明显降低硝酸甘油致偏头痛大鼠模型动物脑组织和血液中的一氧化氮合酶,减少一氧化氮的合成,从而改善偏头痛症状。滴鼻给药的作用优于口服给药；
葛根总黄酮滴鼻给药可明显提高利血平致偏头痛模型动物脑内去甲肾上腺素和多巴胺的含量,提示葛根总黄酮可通过对脑内儿茶酚胺类神经递质的调节作用,以及降低血液中一氧化氮合酶的量,减少一氧化氮的合成,改善偏头痛的症状；
葛根总黄酮滴鼻给药可明显增加阈下剂量戊巴比妥钠所致入睡动物数,作用要优于葛根总黄酮口服给药,其镇静作用有助于消除机体因偏头痛而产生的烦躁、不安等不良情绪；
葛根总黄酮滴鼻给药没有明显的鼻粘膜刺激作用,为进一步研发该制剂提供了安全性评价依据；
葛根总黄酮滴鼻给药没有明显镇痛作用。