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目的
检测血管内皮生长因子(VEGF)及血小板源性生长因子(PDGF)在侵袭性垂体瘤和非侵袭性垂体瘤中的表达。以探讨其与肿瘤侵袭发生的关系及两者之间的相关性。
材料和方法
1切片选择:
采用中国医科大学第二临床医院神经外科2002年01月至2005年10月间手术切除的人脑垂体瘤石蜡包埋标本共计30例。侵袭性垂体腺瘤的临床判断指标为:(1)术中及病理检查发现硬脑膜鞍底骨质受侵。(2)影象学检查提示肿瘤侵犯海绵窦,肿瘤侵犯蝶窦,鞍底骨质破坏或包绕颈内动脉。以此分类,将肿瘤分为侵袭性组(14例)和非侵袭性组(16例)。
2免疫组织化学染色方法
采用及免疫组化方法对VEGF和PDGF的表达进行检测,具体步骤如下:首先将石蜡包埋的标本制成5微米厚切片,用二甲苯脱蜡并再水合。室温下用3%过氧化氢溶液阻断内源性过氧化物酶的活性10分钟后,将切片浸人0.01M构椽酸溶液(PH=6.0)中,用500W微波炉进行抗原修复15分钟。在室温下用正常的非免疫性血浆阻断非特异性反应30分钟,这些切片将含有抗VEGF多克隆抗体和抗PDGF单克隆抗体。这种状况在4摄氏度温度调节下一夜间发生,并在37摄氏度时接下来的90分钟内出现生物素结合的次级抗体。阳性信号用超敏S-P工具通过S-P方法检测出来。切片仍需要苏木素复染。
3数据处理:
采用SPSS10.0统计软件对数据进行统计学处理,选用四格表的Fishers精确概率检验和Spearman等级相关分析进行数据分析,P<0.05被认为有统计学显著差异。
结果
免疫组化显示,侵袭性垂体腺瘤组的VEGF强阳性表达率明显高于非侵袭性垂体腺瘤组(p=0.011,p<0.05);侵袭性垂体腺瘤组的PDGF强阳性表达率明显高于非侵袭性垂体腺瘤组(p=0.026,p<0.05);侵袭性垂体腺瘤组中VEGF及PDGF的表达呈正相关,二者的表达有显著差异
(r=0.389,p=0.034,p<0.05)。
讨论
垂体腺瘤属于良性肿瘤,但部分可向蝶窦、两侧海绵窦、鞍上及鞍旁等周围结构浸润生长。因此,寻找一种有效的途径和方法来阻止肿瘤的侵袭生长是目前研究的热点之一。随着现代病理学、分子生物学、内分泌学的发展。侵袭性垂体腺瘤(IPA)近年来得到深入研究。
VEGF是由两个分子量为17-22kD的相同亚基通过二硫链形成的同源二聚体碱性糖蛋白,在生理性或病理性血管生成中是不可缺少的诱导因子。VEGF在很多正常人和动物组织中表达,但一般表达水平低。在一些代谢旺盛、血供丰富的组织表达常较高。由于生长发育和血管生成的需要,VEGF的表达往往呈较高水平。
PDGF是分子量为30kD的糖蛋白,是成纤维细胞、内皮细胞、血管平滑肌细胞、成骨细胞和神经胶质细胞的促有丝分裂原。它具有胸苷磷酸化酶活性,能可逆的使胸苷去磷酸化为胸腺嘧啶和2-脱氧核糖-1-磷酸。其酶活性对PDGF促血管生成至关重要。它在肿瘤组织中的表达显著高于正常组织,并有促进血管生成的作用。
PDGF可以通过间接的途径即激活内皮细胞的邻近组织细胞,刺激平滑肌细胞释放VEGF等生长因子,促进血管生成。揭示了两者在垂体腺瘤侵袭性形成中的相互关系,为侵袭性垂体腺瘤的治疗提供了一条新的途径。
结论
1VEGF在非侵袭性垂体腺瘤呈阳性表达,在侵袭性垂体腺瘤中显著表达。VEGF在垂体腺瘤发生、发展及侵袭性形成过程中起重要作用,可以成为反映垂体腺瘤生物学行为及侵袭性的重要指标。
2PDGF在非侵袭性垂体腺瘤呈阳性表达,在侵袭性垂体腺瘤中显著表达。PDGF的高表达与垂体腺瘤的发生,发展及侵袭性行为有关。
3VEGF和PDGF在垂体腺瘤中的表达呈正相关关系。PDGF可以通过间接的途径即激活内皮细胞的邻近组织细胞,刺激平滑肌细胞释放VEGF等生长因子,促进血管生成。