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本试验开展了从鳞翅目昆虫柞蚕(A.pernyi)滞育蛹中提取5-脱氧核苷酸方法的研究,研究结果为生产5-脱氧核苷酸原料短缺的问题提供了一条有效的途径。
1.柞蚕蛹是缫丝工业的主要副产物,资源丰富,本研究对柞蚕蛹进行冷冻干燥,再进行脱脂处理,得到脱脂柞蚕蛹粉,对其核酸含量进行测定得知,脱脂柞蚕蛹粉中核酸含量为3.65%,是提取核酸的上好原料;
2.本研究分别用SDS法、浓盐法2种方法从天然动物柞蚕蛹中提取5-脱氧核苷酸,并获得成功。比较其提取效果得知,浓盐法好于SDS法,提取的最佳工艺为:盐浓度10%,提取时间3h,固液比1:6,提取率为0.66%;
3.本研究从麦芽根中提取到5-磷酸二酯酶,与工业上常用的用桔青霉生产5-磷酸二酯酶相比,从麦芽根中提取既经济又简便;
4.用从麦芽根中提取的5-磷酸二酯酶对柞蚕蛹:DNA进行酶解,并用717树脂层析柱和活性炭柱进行纯化,得到了较纯的5-脱氧核苷酸,用高效液相色谱法测得纯度为77.11%,证明产品达到符合医用(或保健品)脱氧核苷酸的标准;
5.采用本研究所用方法从柞蚕滞育蛹提取5-脱氧核苷酸的工艺简单,对设备要求不高,生产成本较低,产品安全系数高。