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目的:
本研究应用SRS型小鼠白血病病毒(SRS-MuLV)复制小鼠逆转录病毒模型,观察益气活血解毒方对小鼠SRS型逆转录病毒模型血浆病毒载量、外周血CD4+T淋巴细胞、脾树突状细胞、IFN-α等的影响,以证明中医是从多靶点来治疗HIV/AIDS,并为运用益气活血解毒法在临床上对艾滋病的治疗提供进一步的科学依据和理论基础。
方法:
SPF级昆明种6周龄雌性小鼠42只,随机分为正常对照组、模型组、益气活血解毒方组(低、中、高剂量)、齐多夫定组,每组7只。实验应用SRS型小鼠白血病病毒(SRS-MuLV)腹腔注射感染小鼠,第二日起用药组分别给与相应药物灌胃(ig),每天一次,连续21天。灌胃21天后进行以下指标的检测:以逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测血浆病毒载量并以光密度扫描对PCR产物的电泳条带进行定量分析;流式细胞仪测定外周血CD4+T淋巴细胞百分率;测定脾脏、胸腺的重量,计算脏体系数并进行病理切片观察;免疫组化方法测量脾脏树突状细胞OD值;ELISA法测定脾脏IFN-α。
结果:
1.与模型组相比,齐多夫定组血浆SRS-RNA相对转录量降低(P<0.01),益气活血解毒方低剂量组、中剂量组和高剂量组的血浆SRS-RNA相对转录量亦降低(P<0.01)。
2.与正常对照组相比,模型组与齐多夫定组外周血CD4+T淋巴细胞均降低(P<0.01);与模型组相比,益气活血解毒方中剂量组、高剂量组外周血CD4+T淋巴细胞均升高(P<0.01),益气活血解毒方低剂量组外周血CD4+T淋巴细胞亦升高(P<0.05);与齐多夫定组相比,益气活血解毒方中剂量组、高剂量组外周血CD4+T淋巴细胞升高(P<0.01),益气活血解毒方低剂量组外周血CD4+T淋巴细胞亦升高(P<0.05)。
3.与正常对照组相比,模型组胸腺指数下降(P<0.01),脾指数升高(P<0.01),齐多夫定组胸腺指数下降(P<0.01),脾指数升高(P<0.05);与模型组相比,益气活血解毒方低剂量组、中剂量组、高剂量组的胸腺指数升高(P<0.01),脾指数下降(P<0.01),齐多夫定组的脾指数亦下降(P<0.01);与齐多夫定组相比,益气活血解毒方低剂量组胸腺指数升高(P<0.05),益气活血解毒方中剂量组胸腺指数亦升高(P<0.01)。
4.与正常对照组比,模型组、齐多夫定组脾树突状细胞OD值均降低(P<0.01),益气活血解毒方低剂量组脾树突状细胞OD值亦降低(P<0.05);与模型组相比,益气活血解毒方中剂量组、高剂量组脾树突状细胞OD值升高(P<0.01),益气活血解毒方低剂量组脾树突状细胞OD值亦升高(P<0.05);与齐多夫定相比,益气活血解毒方中剂量组脾树突状细胞OD值升高(P<0.01),益气活血解毒方高剂量组脾树突状细胞OD值亦升高(P<0.05)。
5.与正常对照组相比,模型组脾脏IFN-α浓度降低(P<0.05);与模型组相比,益气活血解毒方中剂量组脾脏IFN-α浓度升高(P<0.01),益气活血解毒方高剂量组脾脏IFN-α浓度亦升高(P<0.05);与齐多夫定组相比,益气活血解毒方中剂量组脾脏IFN-α浓度升高(P<0.05);与益气活血解毒方低剂量组相比,益气活血解毒方中剂量组脾脏IFN-α浓度升高(P<0.05)。
6.光镜观察:模型组胸腺严重萎缩,皮质淋巴细胞显著减少;脾被膜下有散在瘤细胞,瘤细胞核有明显异型,核大深染,畸形,红髓中弥漫性原粒细胞浸润,淋巴滤泡轻度减少。齐多夫定组胸腺严重萎缩,皮质淋巴细胞显著减少;脾被膜下有散在瘤细胞,瘤细胞核有明显异型,核大深染,畸形。益气活血解毒方各剂量组胸腺轻度萎缩,皮质淋巴细胞减少;脾被膜下有少量瘤细胞,瘤细胞核有明显异型,核大深染,畸形。
结论:
1.与正常对照组相比,模型组小鼠血浆SRS-RNA的相对转录量较高,外周血CD4+T淋巴细胞百分率降低,胸腺指数降低,脾指数升高。病理显示胸腺严重萎缩,皮质淋巴细胞显著减少,脾被膜下有散在瘤细胞,瘤细胞核有明显异型,核大深染,畸形,红髓中弥漫性原粒细胞浸润,淋巴滤泡轻度减少。提示该小鼠模型用于筛选抗艾滋病药物有其依据。
2.益气活血解毒方对SRS病毒有一定的抑制作用,有明显升高外周血CD4+T淋巴细胞百分率的效果。
3.益气活血解毒方能改善SRS-MuLV感染造成的胸腺萎缩和脾肿大。
4.与正常对照组相比,模型组脾脏树突状细胞和IFN-α均有所降低,提示树突状细胞和IFN-α可能与艾滋病有一定关系。益气活血解毒方能升高SRS-MuLV模型中的脾脏树突状细胞和IFN-α。