【摘 要】
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目的研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病K562细胞凋亡作用,探讨DADS诱导K562细胞凋亡作用的时间依赖性与浓度依赖性;并探讨DADS诱导K562细胞凋亡的分子机制,为药物临床应用
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目的研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病K562细胞凋亡作用,探讨DADS诱导K562细胞凋亡作用的时间依赖性与浓度依赖性;并探讨DADS诱导K562细胞凋亡的分子机制,为药物临床应用提供理论和科学依据。方法体外培养人红白血病K562细胞,分为空白组及药物处理组两大组,药物处理组加入不同浓度DADS,取对数生长期细胞进行实验。采用Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术(FCM)分析不同浓度及不同时间DADS对K562细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR法检测DADS作用K562细胞48h后Fas、FasL、Caspase-8基因的mRNA表达变化。结果1、DADS可诱导K562细胞凋亡,K562细胞出现细胞核缩小,染色质凝集、核膜破裂等凋亡特征。2、DADS(作用细胞24h)浓度从10mg/L增至40 mg/L时,其对K562细胞的凋亡率由(11.60±0.83)%增至(37.94±0.87)%;DADS(40 mg/L浓度组)作用时间从24 h增至72 h,其对K562细胞的凋亡率由(37.94±0.87)%增至(47.02±0.66)%,各实验组随时间、浓度增加凋亡率明显增加(p<0.01) ,提示DADS对K562细胞的凋亡效用与药物浓度、作用时间有明显依赖关系3、40mg/L DADS作用K562细胞48 h后,Fas、Caspase-8 mRNA表达水平较对照组上调;FasL mRNA较对照组下调(p<0.05)。结论1、DADS能够诱导K562细胞凋亡。2、其凋亡机制可能与上调Fas、caspase-8,下调FasL,激活Fas/FasL死亡受体通路有关。
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