【摘 要】
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该文以热带假丝酵母为生产菌种,通过对代谢途径的分析,对十三碳二元酸的发酵过程和生产用菌的菌种改造进行了研究.工作包括菌株的驯化,紫外线照射诱变和筛选,摇瓶发酵工艺条
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该文以热带假丝酵母为生产菌种,通过对代谢途径的分析,对十三碳二元酸的发酵过程和生产用菌的菌种改造进行了研究.工作包括菌株的驯化,紫外线照射诱变和筛选,摇瓶发酵工艺条件和药剂条件对DCA<,13>产量的影响,以及DCA<,13>的提取精制等.首先通过对热带假丝酵母的代谢途径的分析,对其代谢过程和调控有了一个较为清晰的描述.以热带假丝酵母(Candida tropicalis)为初发株,对初发菌株进行循减递进的方法进行驯化,利用紫外线照射对其进行诱变处理,照射后,运用对照平皿和指示剂平皿筛选α、ω-氧化能力增强以及β-氧化能力减弱的突变菌株,摇瓶发酵试验,DCA<,13>产量比诱变前产量提高了10％左右,证明紫外线照射对菌株具有改良作用.在DCA<,13>的摇瓶发酵工艺条件试验中,得出通风量、尿素浓度、烷烃浓度、培养温度对DCA<,13>的产量影响显著,摇瓶发酵确定最佳工艺条件为:接种量为15％;摇床转速为120r/min;尿素为最好氮源,添加量为0.14％;发酵温度为30℃;种子种龄为42~45h;底物烷烃浓度为15％.通过考察热带假丝酵母在变化pH条件下的生长和产酸行为,得出了热带假丝酵母菌最佳生长pH值为5.0,最佳发酵pH值为7.5的指标参数.依据试验结果,分析指出体系中一定浓度的糖存在,可以抑制β-氧化和α-氧化,控制合适的糖浓度,二元酸的产量有所提高,结果得出糖浓度为3％时,产酸效果最好.通过摇瓶试验,发现在产酸期补料对产酸有相当的影响,进入产酸期24h和72h时补加糖,对产酸有一定的促进作用,而产酸期48h时补加糖,则对产酸有明显的促进作用.补加烷烃也会提高DCA<,13>的产量,于48h时添加烷烃,效果最好.
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