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Toll样受体(Toll-like receptors，TLRs)，是天然免疫中重要的模式识别受体超家族，它连接着天然免疫与获得性免疫，并在机体抗病原体感染方面发挥重要的作用。研究显示TLR与病原体的感染密切相关，对传染病的预防及治疗具有重要的作用。 本研究以鸡为研究对象，根据Genbank上已发表的鸡TLR15胞外区序列设计一对特异性引物，从鸡脾组织中提取总RNA，通过RT-PCR扩增得到1978bp的目的条带，与pGM-T载体连接，经鉴定为鸡TLR15胞外区基因。再将目的基因片段克隆到pET-32a原核表达载体上，构建原核重组表达质粒，命名为pET-32a-TLR15ER。利用DNAMAN软件将鸡TLR15胞外区序列与Genbank上的参考序列相比对，核苷酸相似性达99.9％。将筛选出的阳性重组表达质粒经IPTG诱导，SDS-PAGE电泳检测，结果显示重组蛋白的大小约为72KDa，与预期一致。分析发现该重组蛋白在大肠杆菌中主要以包涵体的形式存在，用尿素纯化包涵体，对小鼠进行两次免疫后制备多克隆抗体。进行免疫印迹分析(Western blot)，以制备的鼠抗鸡TLR15胞外区为一抗，辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体为二抗，Western blot的结果得到了一条杂交条带，该条带位于72KDa处。对脾脏、肝脏、肺的TLR15进行免疫组织化学检测，发现脾脏中阳性染色最深，肝脏和肺阳性染色较浅，说明脾脏是产生TLR15的主要部位。 本研究通过分子生物学技术对三黄鸡、苏麻鸡、海蓝褐鸡TLR15的5非编码区进行序列分析，同源性均达到99.68％以上，第180、300、366、619、673、697和716位易发生突变。对三者的胞外区和已发表的参考序列进行比对，构建核苷酸序列进化树，显示不同品种鸡的亲源性均达到99.36％以上，胞外区基因亲源性较高，相对保守，有利于病原体的结合。 本研究对TLR15的胞外区进行了遗传特征分析，制备了胞外区的多克隆抗体，分析了TLR15的组织定位，这为研究TLR15在禽类相关疾病的预防和治疗提供理论依据，也为开发新的免疫增强剂提供新的思路。