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本论文以广东省黄皮(Clausenalansium(Lour.)Skeels.)主要栽培品种的幼胚、上胚轴、下胚轴及带腋芽茎段为材料开展了黄皮离体培养研究,并对5个栽培品种的倍性进行探讨。
以从城黄皮和岐山屈督黄皮的上、下胚轴为试材,建立了黄皮胚轴再生体系,获得了黄皮的组培苗。采用SPSSforWindowsU.5统计分析软件对培养结果进行统计分析,得出的最佳初代培养基为WPM+BAlmg.L4+NAA0.3mg.Ll~0.9mg.L1/IBAl.5mg.L-I+GA3O.1mg.L4+蔗糖4%,其中,BA与蔗糖是重要的影响因子;最佳继代增殖培养基为WPM+BAlmg-L%NAA0.5mg.Ll~0.9mg.L-l+GA30.75mg.L-l+AgN0310mg.Ll+CH0.75mg.L4+蔗糖4%~6%:最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.5mg.L-l+间苯三酚100mg.Ll+AC0.3%+AgN03lOmg.L-I,其中间苯三酚和活性炭是启动黄皮生根的重要因素。生根率达5.56%~31.25%,生根率不高,而且仅仅有一条根。
以鸡心黄皮带腋芽的茎段为试材进行离体培养表明,WPM+BAlmg.L-I~1.5mg-L4+CH0.5g.Ll+pvp1g.L4+NAAlmg-L4+TDZ0.05mg.Ll为萌芽的最佳初代培养基;WPM+BAlmg.L-I~1.5mg.L4+CH0.5g.LI+pvplg.L4+2,4-D1.5mg.L-I为是愈伤组织的最佳初代培养基。不定芽继代增殖的最佳培养基为WPM+BA6mg.LI+TDZ0.05mg.L4+NAAlmg.L4+AgN0310mg.L4+蔗糖3.5%+乳糖(或果糖)0.5%+椰乳15%,其中,TDZ是影响增殖倍数的重要因子。
对郁南无核黄皮、鸡心黄皮和甜黄皮3个品种花后lOd~60d的幼胚进行了离体培养表明,’胚龄是影响胚培养成功的关键性因素。在花后30d至幼胚还未退化之前利用胚培养技术即可以达到进行无核黄皮胚抢救的目的。黄皮幼胚在离体培养时有脱分化形成愈伤组织和直接发育成苗两种方式。在WPM+CH0.50g.L4+PVP1g.L-I(或AC0.3%)+AgN0310mg.LJ+GA30.25mgL-I+BAl.5mg.L-I+NAA0.5mg.Ll上,花后lOd~23d的幼胚只形成愈伤组织,花后30d的幼胚有11%~26%已能发育成苗,此后幼胚的成苗率随胚龄增加而升高,花后60d幼胚的成苗率在50%~76.6%。诱导出的愈伤组织能继代,难以再分化。
采用改良压片法对5个黄皮品种进行倍性鉴定,结果显示,从城黄皮、岐山屈督黄皮、甜黄皮、鸡心黄皮和郁南无核黄皮产生的有活力的种子均为二倍体(2n=2x=18)。