转基因微生物安全性评价及检测方法的初步研究

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对在中国释放的转基因耐氨粪产碱菌(Alcaligenes faecalis )A1523及A1511,进行了外源基因的稳定性、菌体生长特征、释放地土壤微生物群落变动等综合性评价,并对转基因微生物安全性评价的层次进行了分析和总结.比较了多种土壤总DNA的抽提及纯化方法,建立了一套方便快捷、灵敏度较高的土壤微生物PCR及分子杂交检测技术,用于直接检测土壤中的目的微生物.以改进的方法抽提土壤微生物总DNA,经低熔点琼脂糖凝胶电泳纯化,用PCR及Southern杂交扩增确认接种至土壤中Bt杆菌的特定DNA片段,可检测到220个菌体/每克土壤,比传统的选择性平板和荧光技术等检测方法快捷、灵敏,省去了微生物培养过程.同时对不经PCR扩增直接以分子杂交检测土壤中的目的微生物也做了尝试.
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