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在使用AOT/异辛烷反胶束系统萃取蛋白质时通常会因为AOT和蛋白质之间存在有强静电相互作用而引起蛋白质的变性,在界面上产生蛋白质和AOT的复合沉淀物。在本文中,通过向AOT/异辛烷反胶束系统中加入乙醇,解决了蛋白质变性的难题,并且相分离时间也大为缩短。在前萃取后及反萃取后,分相时间只需10min或更短。这有利于这项技术在工业上的运用,大大提高生产效率。
在本研究中,通过对前萃取和反萃取各条件的优化,胰蛋白酶的前萃取率和反萃取率分别可以达到90﹪左右和95﹪以上。胰蛋白酶的最终活性产率在88﹪左右。所得的胰蛋白酶的比活为2000U/mg或更高,纯化倍数可以达到5倍。在放大100倍之后,胰蛋白酶的产率仍能达到82﹪。说明反胶束技术放大容易,适合大规模生产。
在传统研究中用反胶束系统从粗原料中提取目标产物的研究很少,或得率不高。本实验实现了从猪胰脏粗提物中分离胰蛋白酶,并且得到了高产率。