【摘 要】
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印楝(Azadirachta indica.A.juss)种仁中含有印楝素A(azadirachtin)等活性成分,主要为四环三萜类化合物,对害虫具有显著的忌避拒食作用和生长抑制作用。基于印楝素配制的生物
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印楝(Azadirachta indica.A.juss)种仁中含有印楝素A(azadirachtin)等活性成分,主要为四环三萜类化合物,对害虫具有显著的忌避拒食作用和生长抑制作用。基于印楝素配制的生物农药在害虫的防治上具有高效性,不伤害天敌,对环境无影响,对哺乳动物和人低毒的特点,印楝被认为最有希望替代化学合成农药的植物源生物农药。目前,印楝的研究主要集中于印楝素有效成分的萃取、结构鉴定及其应用。印楝素的萃取方式多为常规溶剂法萃取,而利用超临界CO2萃取新技术的条件仍不成熟,对萃取的工艺及萃取后主要成分的组成和生物活性研究较少。本文对印楝素的分析、纯化和萃取进行较系统的研究,建立一条可行的工艺路线,初步分析和鉴定印楝油中高级脂肪酸成分,并对玉米象(Sitophilus zeamais Motschulsky)进行初步防治研究,为印楝生物农药应用于粮食贮藏提供一定的理论基础。得到结论如下:1.通过硅胶柱层析和TLC法对印楝活性物质进行分离纯化,通过紫外光谱法和高效液相色谱法测定标准物质进行对照,得到纯度大于95%的印楝素A,分子式为C35H44O16,分子量为720.7。2.通过GC-MS测定印楝油中高级脂肪酸成分,鉴定结果认为溶剂浸泡萃取印楝油和超临界CO2萃取物中高级脂肪酸成分基本一致。其中油酸含量为51.15%,硬脂酸含量为19.13%,棕榈酸含量为16.78%,亚油酸含量为9.86%,花生酸含量为1.24%,其它含量低于1%的高级脂肪酸还有顺-3-辛基-环氧乙烷-辛酸,山萮酸,9-十八(碳)烯酸,11-二十碳二烯酸,9-十六碳烯酸,十七(烷)酸等。3.确定高效液相色谱法是检测印楝素的有效方法,其检测条件:色谱柱为C18柱,3.9mm×150mm,流动相为乙腈:水=30:70,流速为1mL/min,检测波长为215nm。4.本试验采用溶剂浸泡法和超临界CO2萃取法两种工艺提取印楝中的活性成分,对两种方法选择不同的因子,分别使用均匀设计对工艺条件建立回归模型,进行优化。在试验范围内通过寻优获得溶剂浸泡萃取法萃取印楝素A的最佳工艺参数:石油醚Ⅰ萃取的用量和时间为230mL和20min,甲醇萃取的用量和时间为310mL和345min,乙酸乙酯萃取的用量和时间为120mL和85min。在试验范围内通过寻优获得超临界CO2萃取法萃取印楝素A的最佳工艺参数:压力为37MPa,温度为43℃,时间为165min,夹带剂的体积为13mL。
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