【摘 要】
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目的:转基因食品的食用安全性越来越引起人们的广泛关注.本文以转Cry1Ie基因抗虫玉米为转基因作物的代表,以Cry1Ie基因在原核系统(大肠杆菌E.coli)表达的Cry1Ie蛋白为模式蛋
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目的:转基因食品的食用安全性越来越引起人们的广泛关注.本文以转Cry1Ie基因抗虫玉米为转基因作物的代表,以Cry1Ie基因在原核系统(大肠杆菌E.coli)表达的Cry1Ie蛋白为模式蛋白,在等同性分析的基础上代替Cry1Ie基因在玉米中表达的相应外源蛋白,进行Cry1Ie蛋白的热和酶的稳定性研究、生物信息学研究、小鼠短期喂养试验.本研究将为我国建立转基因食品引入外源蛋白的安全性评价体系提供了技术平台和科学依据.结论:1.构建了能正确表达Cry1Ie蛋白的大肠杆菌表达系统,得到了纯度较高的Cry1Ie纯化蛋白,并制备了相应的多克隆抗体.2.经等同性试验鉴定,大肠杆菌表达的Cry1Ie蛋白与转基因玉米中表达的相应外源蛋白具有相同的免疫反应性及相似的生物学活性,可以用此蛋白进行评价试验.3.经稳定性试验研究,转基因玉米中的外来蛋白Cry1Ie在热加工条件下可以迅速分解,在生理条件胃蛋白酶(pH<2)作用下很快分解.4.Cry1Ie蛋白与已知的毒性和过敏性蛋白(6-8个氨基酸连续相同的)无同源性.5.纯化的Cry1Ie及其包涵体对小鼠体重、血生化、肠道菌群无影响.
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