农杆菌介导的大豆遗传转化受体系统的创新性优化

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xueyingnn
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大豆是重要的作物,而遗传转化是培育突破性的大豆新品种的先进方法。到目前为止,国内外已经建立起了多种大豆遗传转化受体系统,也得到了一些遗传转化的大豆植株,但总体的工作效率还很低。本文介绍了通过技术创新优化了大豆遗传转化体系以及应用这些创新的方法获得了转基因的植株的过程和结果。  在优化大豆胚轴外植体子叶腋芽增殖系统的过程中发现,质量最好的胚轴外植体来自在12 h/d的光照条件下培养4 d的大豆幼苗;在种子萌发培养基中添加BA不利于子叶腋芽的增殖,而种子的接种定位的不同则对种子萌发质量没有大的影响;制备外植体以保留子叶腋芽,在齐靠幼苗子叶内侧下端进行切割为最合适;采用稍高浓度的BA溶液浸泡胚轴外植体上端是最有利于子叶腋芽增殖的处理方式,采用不添加活性炭和抗生素的培养基有利于胚轴外植体生根。  在优化大豆下胚轴再生系统的过程中发现,种子萌发培养基中添加BA同样不利于下胚轴外植体的不定芽再生;以在外侧齐靠幼苗子叶基部切割,刚好去除了子叶腋芽的下胚轴外植体的再生能力最强;采用30 mg/L BA溶液浸泡下胚轴外植体上端20min是最有效的促进再生的方法;添加32-64 g/L蔗糖的MSB5培养基对下胚轴外植体再生最为有利;相对于其他品种,华春2号的再生效果最佳。  在优化大豆遗传转化体系的过程中发现,种子萌发培养基中添加BA不利于所获得的胚轴外植体在农杆菌侵染处理后的芽体增殖;转化时,先用BA溶液对外植体进行处理和1 d的预培养,再采用局部侵染的方式对胚轴外植体的上端进行农杆菌侵染,然后进行3 d黑暗条件下的共培养可确保转化效果;外植体恢复培养以直接竖插的方式接种至添加50-100 g/L蔗糖的培养基上培养30 d为适宜;对转化体进行筛选培养时,宜保留外植体上的一部分胚轴,培养方式以横放于培养基表面为合适;草胺磷作为筛选剂,筛选压以3 mg/L为宜;基因型对转化效果有影响,以华春2号的表现相对较好,可优先作为遗传转化的实验材料品种。  在建立大豆微嫁接体系的过程中发现,获取砧木的种子萌发培养基中不宜添加BA,合适的萌发培养时间为5 d,以保留完整胚根的下胚轴砧木的嫁接效果最好;顶芽和芽条均可作为接穗,不需要对接穗进行任何处理就可得到很好的嫁接效果。在嫁接方式方面,相对于插接法,劈接法的适用范围较广;接穗嫁接后以竖插的方式进行培养为最合适;最适宜于嫁接苗的培养的培养基为添加50 g/L蔗糖但不添加NAA和抗生素的MS培养基。  应用以上建立的创新性技术进行大豆转化ALO基因的实验,获得了经PCR检测证实带有目的基因和标记基因的植株。
其他文献
本文研究了等离子鞭天线自重构性、隐身性能和米波超短间距八木天线技术,在此基础上首次提出了米波等离子双折合八木天线,并加以初步分析,为宽带双频、双极化、交叉极化接收
在现代战争中,由于战争中的电磁环境日益复杂,抗干扰技术越来越得到人们的重视。自适应数字波束形成(ADBF)技术的出现使得抗干扰技术的性能大为提高。为了将这一技术应用于具体
星载成像光谱仪由于其高光谱分辨率、强波段连续性和大观察范围等特点已经被越来越广泛的应用到资源监测、灾情预警、军事防御等各领域。但是开发周期长,制造成本高的缺点大
反射面天线是现代卫星通信系统中应用最为广泛的天线形式。而让同一套反射面天线实现多馈源多频段同时工作,能够有效地提高反射面的利用率,所以基于FSS的多频段反射面天线在卫
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
摘要:本文针对目前高中英语词汇教学中存在的音形脱离、词汇运用困难等问题,从音形义联系、记忆方法、课外指导词法等方面提出一些可行性措施。  关键词:音形脱离;词汇运用;音形义联系;英语教学  中图分类号:G632.0 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2016)04-0017  2017年新高考英语试题将取消单项选择和短文改错,多年前就取消了单词拼写这一题型,这使相当一部分学生大喜过望,
本论文通过对壳聚糖(Chitosan,CS)、甘蔗渣(Sugarcane Bagasse,SB)两种天然生物高分子材料进行化学修饰,合成出两种新型污水处理吸附剂,并分别对铜离子水溶液及染料水溶液进行吸
近年来,对于图像配准的研究受到了广泛的关注。图像配准能够实现不同拍摄条件下获得的图像间的匹配,已被应用于诸多领域,如医学图像分析中的疾病状态监测、计算机视觉中的三维图像重建,遥感图像中的变换检测。这些应用对图像配准提出了很高的要求,如亚像素的精确度、全自动化和实时性。目前还没有一种完美的配准方法能够满足所有的要求,特别是在遥感图像处理领域。遥感图像受传感器机理、光照变换等因素的影响,图像间灰度差异
学位
紫锥菊(Echinacea purpurea(L.)Moench.)是菊科(Asteraceae)紫锥菊属(Echinacea(L.))多年生草本植物,自然分布于美国中东部及加拿大南部地区。紫锥菊是闻名世界的“免疫”草药