【摘 要】
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T-2毒素是镰刀菌株的代谢产物,是单端孢霉烯族霉素中毒性最强的一种毒素,广泛存在于粮食作物及其半成品中。人畜误食污染的谷物后,会产生中毒症状,如呕吐、腹泻、发烧等,严重
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T-2毒素是镰刀菌株的代谢产物,是单端孢霉烯族霉素中毒性最强的一种毒素,广泛存在于粮食作物及其半成品中。人畜误食污染的谷物后,会产生中毒症状,如呕吐、腹泻、发烧等,严重时甚至损害造血系统,导致机体死亡。1973年,FAO和WHO在日内瓦召开的联席会议上,把T-2毒素作为自然作物中重要的食品污染源。因此对T-2毒素的定性定量分析显得尤为重要。本研究首先用EDC法将小分子半抗原T-2毒素与BSA以及OVA分别交联,获得的交联产物中T-2-HS-BSA作为免疫抗原,T-2-HS-OVA作为检测抗原。通过免疫Balb/c小鼠获得高效价的小鼠,其中效价最高达到1:32000。通过优化抗T-2毒素多克隆抗体的ELISA条件,确定ELISA最优工作条件为:包被抗原T-2-HS-OVA的浓度为1.25 μg/mL;酶标二抗HRP-IgG的稀释比例为1:4000。用杂交瘤技术将骨髓瘤细胞Sp2/0和小鼠脾细胞用PEG-1450融合成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞经多次亚克隆,得到3株亚类为IgG的抗T-2毒素的单克隆抗体细胞株,分别命名为4B1(IgG2b)、7C3(IgG2b)、7A3(IgG2b)。细胞染色体计数分析显示,杂交瘤细胞染色体102～105条。取其中一株4B1(IgG2b)在体内诱生抗体。腹水纯化后,进行效价和亲和力测定,结果显示腹水效价为1:8000,单抗效价为1:4000,亲和力常数Kaff为4.5×108L/mol,属于高亲和力抗体。该单抗与其他真菌毒素没有交叉反应。上述实验制备的高亲和力的抗T-2毒素单克隆抗体,为T-2毒素ELISA检测试剂盒的制备奠定了基础。该单克隆抗体也可用于胶体金快速检测试剂盒的研制。
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【分类号】G623.23 一、我理解的语文教学中的群文阅读 群文阅读就是在课堂教学的单位时间内，呈现多篇文章，多到四五篇，甚至七八篇，围绕同一个议题展开的探究性阅读教学，语文教学需要群文阅读。但在短短的一节课里，要设计好大量的阅读内容，让学生学有所获，对老师也提出了很大的挑战。课堂上，如果要让学生读“一群”文章，就意味着教师要去读更多的文章，因为只有阅读丰富的教师，才能引导学生丰富阅读的内容。
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