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肺癌是当前全世界发病率及死亡率最高的癌症，其中75-85％为非小细胞肺癌(non-small-celllungcancer，NSCLC)。中药在非小细胞肺癌的治疗中扮演着一个极为重要的角色。但中药中的什么成分在起着抗癌作用及其机理如何有待研究。山竹果皮是泰国的一种传统医药，具有较好的抗癌活性。Griffipavixanthone是从藤黄科藤黄属(Garcinia)的山竹(G.mangostana)果皮中提取的一种具有独特结构的双口山酮(xanthones)化合物，关于该化合物的药理活性研究少有报道。本论文主要对Griffipavixanthone抗H520细胞作用及其机理进行研究。为其应用于NSCLC的临床治疗提供实验依据。 本论文采用3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4，5-Dimethylthiazolyl-2-yl)-2，5-diphe-nyltetrazolium bromide，MTT)比色法，中性红摄取(Neutral red uptake，NRU)法，检测Griffipavixanthone的体外抗肿瘤活性：通过流式细胞术碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)染色检测细胞周期的改变；吉姆萨(Giemsa)染色，Hochest33258荧光染色，透射电镜观察细胞凋亡形态的变化，磷脂结合蛋白/碘化丙啶(AnnexinV/PI)，乳酸脱氢酶(LDH)渗出法检测H520细胞凋亡与坏死；最后采用分光光度法检测Caspase-3酶活性变化和流式细胞术(flow Cytometry，FCM)检测H520细胞线粒体膜电位与活性氧(Reactive oxygen species，ROS)变化等机理作用。 研究结果表明，Griffipavixanthone可抑制多种肿瘤细胞生长，显著抑制人非小细胞肺癌H520细胞，人前列腺癌DU145、LNcaP细胞，人结肠癌SW-480、HT-2P细胞，人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖，并呈现出一定的剂量效应关系。MTT比色法和NRU法实验均表明Griffipavixanthone对H520细胞具有明显的细胞毒作用，并呈现出一定的时间和浓度依赖性。 用形态学方法、核荧光染色、LDH活力测定细胞周期分布及AnnexinV/PI双染法证实了Griffipavixanthone诱导H520死亡的机制为细胞凋亡。荧光显微镜和透射电子显微镜下细胞呈现明显的凋亡形态学特征，细胞膜出泡、细胞核浓缩且有颗粒状的凋亡小体出现。LDH实验，测定凋亡和坏死细胞中LDH的活力，0.785μM-3.125μMGriffipavixanthone作用于H520细胞48h，凋亡细胞中LDH活力显著增加，而坏死细胞中的LDH活力没有显著的变化，当Griffipavixanthone的浓度增加至6.25μM时坏死细胞中的LDH活力才有所增加。流式细胞术检测细胞凋亡显示，随着Griffipavixanthone浓度从3.125μM增加到12.5μM，早期凋亡细胞明显增加，以上均说明Griffipavixanthone诱导H520发生凋亡。另外还可诱导H520细胞周期阻滞，影响细胞周期的进程，最终导致细胞凋亡。 采用分光光度法和流式细胞术发现，Griffipavixanthone通过激活caspase-3，降低线粒体膜电位和促进细胞ROS的产生，通过激活以线粒体为中心的信号转导途径而诱导细胞凋亡。 以上结果表明Griffipavixanthone显著抑制H520细胞的增殖，并呈现出一定的剂量效应和时间效应关系。Griffipavixanthone可以诱导H520细胞凋亡与细胞周期阻滞；通过激活Caspase-3蛋白酶、产生ROS破坏线粒体引起线粒体膜电位下降，最终导致细胞凋亡。