【摘 要】
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导致严重急性呼吸综合征(SARS)世界性爆发流行的病原体是一种新型的冠状病。毒SARS冠状病毒(SARS-CoV),这是一种RNA单链正链病毒,可以导致人体以呼吸系统症状为主要表现的全
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导致严重急性呼吸综合征(SARS)世界性爆发流行的病原体是一种新型的冠状病。毒SARS冠状病毒(SARS-CoV),这是一种RNA单链正链病毒,可以导致人体以呼吸系统症状为主要表现的全身疾病。SARS-CoV表面包含有4种膜蛋白,其中最为重要的是Spike蛋白,它是介导病毒与宿主细胞受体相结合并侵入细胞的主要蛋白,同时也包含诱导机体产生中和抗体的主要抗原位点。通过一系列分子克隆技术,利用哺乳动物细胞蛋白高量表达纯化平台,在哺乳动物细胞中表达了接近于全长的Spike蛋白以及它的一系列突变株。同时通过引入ACE2基因敲除小鼠模型,证实了ACE2是SARS-CoV在机体内主要受体,SARS-CoV通过Spike蛋白与ACE2结合进入宿主细胞,并且引起ACE2表达的下调进而影响肾素-血管紧张素系统,造成或者加剧急性肺损伤。Spike蛋白与ACE2结合的核心位于第318到510位氨基酸,仅包含这一区域的蛋白突变株同样可以诱发ACE2表达的下调和机体的急性肺损伤。感染人的H5N1型禽流感病毒是一种变异的新病毒,多数禽流感患者症状为高热、咳嗽、流涕并伴有严重的肺损伤。细胞自噬(autophagy)是细胞程序性死亡的一种,我们用H5N1型禽流感病毒、灭活H5N1型禽流感病毒和重组H5蛋白分别感染Hela细胞和A549细胞,通过电镜观察发现它们能引起不同程度的autophagy,同时通过autophagy的标志物MAP1LC3的聚集实验确认了这个结果。通过RNA interference技术,证实了H5N1型禽流感病毒是通过P38-TSC2-mTOR这条信号通路来诱导细胞发生autophagy,进一步通过动物实验,我们证实了H5N1型禽流感病毒可以诱导小鼠产生急性肺损伤。
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