【摘 要】
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该研究通过筛选山羊基因组文库的方法,在世界上首次获得了山羊发情相关输卵管糖蛋白(goatestrus-associatedoviductualglycoprotein,gEGP)基因片段.我们以山羊肝为材料构建的
【出 处】
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中国科学院发育生物学研究所 中国科学院遗传与发育生物学研究所
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该研究通过筛选山羊基因组文库的方法,在世界上首次获得了山羊发情相关输卵管糖蛋白(goatestrus-associatedoviductualglycoprotein,gEGP)基因片段.我们以山羊肝为材料构建的山羊基因组文库,滴度达1.15×10<6>pfu/ml,保证得到任一期望的DNA片段的概率在99﹪以上.利用牛EGPcDNA为探针,筛选上述基因组文库,得到一个含有18Kb插入片段的阳性克隆;然后参考牛和绵羊的EGPcDNA序列设计引物,PCR扩增阳性克性λDNA,获得了两个片段,分别含有外显子3、4、5和外显子8、9.对应的外显子序列与绵羊、牛、猪、狒狒、猕猴、人、仓鼠、小鼠的EGPcDNA序列的同源性依次为:99.6﹪、96.3﹪、89.2﹪、88.4﹪、88.0﹪、87.4﹪、84.3﹪、74.8﹪.外显子/内含子边界符合保守的GT/AG原则;与人、仓鼠、小鼠的基因相比较,发现拥有许多几丁质酶超家族成员所共有的特征,证实了EGP家族与几丁质酶家族在进化和功能上的相关性.
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