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由于生物样品中高丰度蛋白以及高浓度盐的存在对众多低丰度蛋白质以及多肽的分析产生严重抑制,提高蛋白组学研究分析方法的灵敏度和选择性已经成为分析化学领域的热点问题。本文致力于低丰度蛋白以及多肽的前处理技术,将介孔碳材料应用于复杂生物样品中内源性多肽、糖链和磷酸化肽的特异性富集。 采用原位碳化的方法,将十六烷基三甲基溴化铵同时作为模板和碳源,制备了具备磁性的介孔碳材料,其孔径尺寸为3.61 nm,比表面积为254 m2·g-1。在多肽的选择性富集研究中,该材料富集选择性极高(牛血清白蛋白酶解液与牛血清白蛋白摩尔比为1∶400),检测限低至0.2 fmol。在人血清中内源性肽段分析中,20μL样品中鉴定到2198条特异性内源性肽段。 以SBA-15为模板,多巴胺作为碳源,制备了高度有序的介孔碳材料,其孔径为2.67nm,比表面积高达1223 m2·g-1,对糖链具有良好的富集选择性,检测限为0.5 ng·μL-1。基于碳材料与糖链特殊结合力以及尺寸排阻效应,有效排除蛋白质和其他杂质干扰,实现人血清中30条糖链的特异性富集。 采用三嵌段聚合物为软模板,引入酚醛树脂、氧化锆和氧化铁进行共组装,并将氧化铁同时作为磁源,制备了一种金属氧化物负载的介孔碳材料。该材料比表面积达442m2·g-1,孔径为4.8 nm。两种金属氧化物修饰使得该材料兼具磁性和亲水性能,金属与磷酸基团的螯合能有效富集低丰度磷酸肽。磷酸肽富集的检测限低至1.5 fmol,富集选择性较高(β-酪蛋白酶解液和牛血清白蛋白摩尔比达1∶500)。最终此材料实现了人血清和脱脂牛奶酶解产物中磷酸化肽的高选择性富集,分别检测到4条和18条磷酸肽。