【摘 要】
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牙齿因外伤、炎症、肿瘤、牙周病等原因缺失后，牙槽嵴就会失去功能性刺激，会很快出现明显地吸收。失牙后如果未能进行及时的干预，则在种植治疗时，会发现很多患者出现明显的牙槽嵴
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牙齿因外伤、炎症、肿瘤、牙周病等原因缺失后，牙槽嵴就会失去功能性刺激，会很快出现明显地吸收。失牙后如果未能进行及时的干预，则在种植治疗时，会发现很多患者出现明显的牙槽嵴萎缩，这就造成剩余骨量不能满足种植体植入所需要的牙槽嵴骨量要求。目前，种植体周围少量的骨缺损，最常用的骨增量方式是引导骨再生术。引导骨再生技术的生物学原理为:将屏障膜置于软组织与骨组织之间形成生物屏障，制造一个相对封闭的组织环境，阻止软组织细胞进入骨缺损区，因软组织的修复速度比骨组织快，可占据骨缺损区就会影响骨细胞在母骨的表面形成网状骨。生物屏障膜同时还能保护血凝块，维持血块充填间隙，实现种植体周围骨缺损区的骨修复性再生。 临床中常将生物屏障膜与植骨材料联合应用，在骨缺损区，放入植骨材料作为骨组织生长支架，并在其表面用生物膜覆盖，这就可防止生物膜塌陷并刺激新骨的生成。临床上种植体周围骨缺损修复最常用的骨移植材料为无机小牛骨粉，无机小牛骨(Bio-Oss)是经过特殊工艺加工，去除了小牛松质骨中的所有有机成分，因此将其植入宿主体内不易引起过敏反应和免疫反应，并具有很好的生物相容性。无机小牛骨内部被保留下来的空隙及骨小梁为成骨细胞的长入提供了支架，这有利于细胞的吸附、增殖及成骨。但无机小牛骨(Bio-Oss)有其局限性，因为Bio-Oss只具有骨引导特性不具有骨诱导特性，在种植体周围骨缺损区植入无机小牛骨粉(Bio-Oss)后需要6个月的无载荷愈合，这就延长了种植义齿的修复时间。为改善无机小牛骨特性，加快骨愈合，本研究采用一种活性短肽对无机小牛骨(Bio-Oss)进行表面修饰。 本研究采用RGD多肽对无机小牛骨粉进行修饰，观察分析MC3T3-E1细胞在RGD修饰的无机小牛骨粉上的黏附、增殖及分化。制备合适浓度的RGD溶液，采用浸泡法将Bio-Oss浸泡在RGD溶液中一定时间，制备出RGD/Bio-Oss复合材料。因活细胞线粒体中的琥珀色脱氢酶可将MTT还原为蓝紫色结晶甲瓒，沉积在细胞中。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪测定其吸光值，可间接反应细胞数量。采用MTT法检测MC3T3-E1细胞1h、2h、3h在复合骨粉材料上的黏附，发现细胞在RGD修饰的无机小牛骨粉表面黏附结果显著高于无RGD修饰的无机小牛骨粉。采用扫描电镜观察细胞在复合骨粉材料上的黏附形态，与细胞在没有RGD修饰的骨粉材料的形态进行比较发现细胞在RGD修饰的骨粉表面更伸展，伪足更多。对于细胞增殖情况我们采用检测DNA浓度来定量分析细胞1d、3d、5d、7d的增殖，发现RGD对细胞增殖无明显作用。成骨细胞开始分化时，碱性磷酸酶表达增加。因此我们采用ALP检测细胞7d、14d在骨粉材料上成骨分化的情况，根据实验结果发现RGD对MC3T3-E1细胞分化有一定促进作用。 综上所述，RGD修饰后的Bio-Oss有易于细胞黏附，并可促进前成骨细胞分化为成骨细胞。因而RGD多肽可用于无机小牛骨粉表面修饰以改善其生物特性，使Bio-Oss具有一定的骨诱导作用，在加快骨愈合方面有良好的应用前景。
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