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目的:
观察减味小柴胡汤体内抗甲型H1N1流感病毒的作用,探究其可能的免疫学机制,并为减味小柴胡汤治疗甲型H1N1流感提供中医学理论支撑。
方法:
将72只6周龄的健康雄性昆明小鼠按照随机数字表法分为6组,每组12只,经甲型H1N1病毒鼠肺适应株(FM1)滴鼻复制小鼠感染甲型H1N1病毒模型,以减味小柴胡汤为实验药剂,以小柴胡汤原方、银翘散、磷酸奥司他韦做阳性对照。从感染之日起,连续观察5d,观察记录小鼠的发病情况。给药5d后取材,小鼠摘眼球采血,离心取血清,ELISA法测定各组小鼠血清中细胞因子IL-2、IFN-γ的水平。取小鼠肺、脾称重并记录,计算肺指数、脾指数。取小鼠肺组织在4%多聚甲醛溶液中固定,石蜡包埋、HE染色后显微镜观察肺组织病理变化。
结果:
1减味小柴胡汤对实验小鼠血清IL-2、IFN-γ水平的调节作用
与对照组比较,模型组、银翘组小鼠血清IL-2的水平明显增高(P<0.01);与模型组相比较,原方组和减味组小鼠血清IL-2的水平明显降低(P<0.05);与减味组比较,银翘组小鼠血清IL-2水平明显增高(P<0.05)。
与对照组比较,模型组小鼠血清IFN-γ的水平明显增高(P<0.05);与模型组相比较,原方组和减味组小鼠血清中IFN-γ的明显降低(P<0.05)。
2减味小柴胡汤对实验小鼠脾指数、肺指数的影响
与对照组比较,减味组、原方组小鼠脾指数明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,减味组、原方组小鼠脾指数明显升高(P<0.05,P<0.01)。
与对照组比较,模型组小鼠肺指数明显增高(P<0.01);与模型组比较,达菲组、原方组、减味组、银翘组小鼠肺指数均明显降低(P<0.01,P<0.05)。
3实验小鼠肺组织病理观察
镜下观察到对照组小鼠肺组织结构正常,肺泡清晰,无充血、水肿等炎性改变。模型组小鼠肺组织出现明显肺间质炎症,肺泡间隔增宽,支气管上皮脱落,肺间质有炎性细胞浸润,以单核细胞为主。各给药组肺间质病变较轻,肺泡间隔增宽较轻,炎性细胞浸润较轻,原方组和减味组改善较显著。
结论:
1减味小柴胡汤能够降低甲型H1N1病毒感染小鼠血清IL-2和IFN-γ的水平。
2减味小柴胡汤能够提升甲型H1N1病毒感染小鼠的脾指数,降低其肺指数,减轻其肺部炎症反应。
观察减味小柴胡汤体内抗甲型H1N1流感病毒的作用,探究其可能的免疫学机制,并为减味小柴胡汤治疗甲型H1N1流感提供中医学理论支撑。
方法:
将72只6周龄的健康雄性昆明小鼠按照随机数字表法分为6组,每组12只,经甲型H1N1病毒鼠肺适应株(FM1)滴鼻复制小鼠感染甲型H1N1病毒模型,以减味小柴胡汤为实验药剂,以小柴胡汤原方、银翘散、磷酸奥司他韦做阳性对照。从感染之日起,连续观察5d,观察记录小鼠的发病情况。给药5d后取材,小鼠摘眼球采血,离心取血清,ELISA法测定各组小鼠血清中细胞因子IL-2、IFN-γ的水平。取小鼠肺、脾称重并记录,计算肺指数、脾指数。取小鼠肺组织在4%多聚甲醛溶液中固定,石蜡包埋、HE染色后显微镜观察肺组织病理变化。
结果:
1减味小柴胡汤对实验小鼠血清IL-2、IFN-γ水平的调节作用
与对照组比较,模型组、银翘组小鼠血清IL-2的水平明显增高(P<0.01);与模型组相比较,原方组和减味组小鼠血清IL-2的水平明显降低(P<0.05);与减味组比较,银翘组小鼠血清IL-2水平明显增高(P<0.05)。
与对照组比较,模型组小鼠血清IFN-γ的水平明显增高(P<0.05);与模型组相比较,原方组和减味组小鼠血清中IFN-γ的明显降低(P<0.05)。
2减味小柴胡汤对实验小鼠脾指数、肺指数的影响
与对照组比较,减味组、原方组小鼠脾指数明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,减味组、原方组小鼠脾指数明显升高(P<0.05,P<0.01)。
与对照组比较,模型组小鼠肺指数明显增高(P<0.01);与模型组比较,达菲组、原方组、减味组、银翘组小鼠肺指数均明显降低(P<0.01,P<0.05)。
3实验小鼠肺组织病理观察
镜下观察到对照组小鼠肺组织结构正常,肺泡清晰,无充血、水肿等炎性改变。模型组小鼠肺组织出现明显肺间质炎症,肺泡间隔增宽,支气管上皮脱落,肺间质有炎性细胞浸润,以单核细胞为主。各给药组肺间质病变较轻,肺泡间隔增宽较轻,炎性细胞浸润较轻,原方组和减味组改善较显著。
结论:
1减味小柴胡汤能够降低甲型H1N1病毒感染小鼠血清IL-2和IFN-γ的水平。
2减味小柴胡汤能够提升甲型H1N1病毒感染小鼠的脾指数,降低其肺指数,减轻其肺部炎症反应。