生物学方法在环境内分泌干扰物筛选及检测中的应用

来源 :中国科学院生态环境研究中心 | 被引量 : 0次 | 上传用户:10198223
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一些合成的化合物能够模拟或阻断天然激素,刺激或抑制激素的生物效应、干扰激素的合成、转运以及清除等生物过程,或者改变神经、免疫和内分泌系统的正常调节功能,从而对人类健康造成危害,这类化合物称为内分泌干扰物(Endocrinedisrupting chemicals,EDCs)。环境雌激素是其中最重要的一类化合物,也是目前最受重视、研究最多的、最详细的一类。通过与雌激素受体结合或者影响细胞信号途径等方式模仿或干扰雌激素,发挥类似于雌激素效应的化合物,称之为环境雌激素(Environmental estrogens)。二恶英类化合物(Dioxin-like chemicals)因为其毒性而成为另一类引人关注的内分泌干扰物。   体外实验(in vitro)方法是一种非常有用的实验技术,用于测定具有复杂基质的环境样品的某类受体介导的化合物的生物活性或毒性。这些存在于环境样品中的化合物是通过相同的作用机制发挥作用的。   本论文针对体外实验(in vitro)方法在环境内分泌干扰物分析中的应用,研究了两种体外实验体系--受芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)介导的(类)二恶英活性(dioxin-like)和受雌激素受体(estrogen receptor, ER)的雌激素活性,在复杂环境样品分析和风险评价中的应用。在本论文中,应用这两种体外实验体系对来自于天津海河和大沽河的底泥样品中二恶英活性和雌激素活性进行了测定。并测定了来自于环渤海八个城市的软体动物提取物中二恶英活性。   卵黄蛋白原(Vtg)是一种灵敏的雌激素或类雌激素效应的生物标志物。本论文以分析检测卵黄蛋白原为研究手段,室内模拟暴露同MCF-7体外细胞实验相比较,研究水环境中几种化合物的雌激素活性。我们利用MCF-7细胞系的体外细胞实验测定了E2、E1、OP、NP和BPA几种目标化合物的雌激素活性。结果显示,这几种化合物都能够引起MVLN细胞的响应,其雌激素活性大小顺序为E2>E1>OP>NP>>BPA。同时,利用室内模拟暴露实验对泥鳅作为雌激素效应的模型动物进行了初步探讨。检测典型雌激素化合物暴露下泥鳅体内Vtg的含量变化,评估了这几种化合物在动物实验中的雌激素活性,结果为E2>BPA>OP>NP。   同时,本论文对Vtg的纯化、降解、保存条件和抗体纯化作了系统的研究。
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