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目前,单胺氧化酶(Monoamine oxidase, MAO)抑制剂在治疗阿尔茨海默症,抑郁症和帕金森病方面具有重要作用,但是现有的药物大多存在副作用。因此开展从天然植物当中寻找MAO抑制剂的研究,寻找母核结构新颖的化合物对发现新药具有重要的指导意义。为了准确快速的得到活性单体化合物,本课题对天然单胺氧化酶抑制剂薄层色谱(Thin Layer Chromatography, TLC)生物自显影方法进行了研究。(1)构建了MAO抑制剂的TLC生物自显影方法。a.适用于MAO抑制剂TLC生物自显影显色剂的筛选。筛选了14种酚类化合物,发现同种酚类化合物反应后出现的颜色是属于同一色系的。但是遗憾的是这些化合物的显色反应在执行TLC生物自显影实验时,没有产生预期的背景颜色。原因可能是因为它们对MAO起到了抑制作用,反应没有生成H2O2。b.用MTT代替文献方法中的NBT为显色剂,得到了一套反应时间短,重现性好,酶用量少,背景明显的TLC生物自显影方法。改进的TLC生物自显影方法可检测到的磷酸异丙烟肼的最小剂量为1×10-2μg,氯吉灵的最小剂量为1×10-2μg,帕吉林的最小剂量为1×10-2μg。(2)利用改进的TLC生物自显影方法对34种中药有机酸提取物进行了抗MAO活性测定。发现路路通有机酸提取物很有可能含有天然MAOIs。对其有机酸提取物进一步分离,得到了4种未被报道过的活性较好的天然MAOIs,分别是没食子酸,没食子酸乙酯,对-二没食子酸,对-二没食子酰乙酯。其中没食子酸乙酯,与MAO-A和MAO-B的三维分子对接实验结果表明,它分别能和MAO-A, MAO-B各通过两条氢键形成一个复合体,从而分别对MAO-A, MAO-B产生抑制。(3)从中药牵牛子和石榴皮有机酸提取物中分离得到了没食子酸,鞣花酸和咖啡酸实验测定其均具有MAO抑制活性,其IC50分别为1.7μg/mL,5.8μg/mL,2.9μg/mL。