论文部分内容阅读
卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,发病率居妇科恶性肿瘤第三位,但致死率却居于首位,具有恶性程度高、病情进展快、易复发、预后差等特点。卵巢肿瘤组织学种类复杂多样,上皮性肿瘤是最常见的类型。上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer,EOC)占卵巢原发性恶性肿瘤的85%-90%,初诊时70%已属晚期,五年生存率徘徊在30%-40%之间。近年来,越来越多的研究推测引起慢性炎症性疾病的微生物可能为癌症的起始因素。而女性的盆腔可以通过生殖道接触外界的病原体,因此传染性病原体在卵巢癌中可能发挥潜在作用。人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)属于β疱疹病毒,对于HCMV与人类疾病的关系,目前已经开展了多方面的研究。既往有学者发现HCMV DNA或mRNA存在于某些肿瘤组织中,并且可以在其血清学样本中检测到HCMV抗体水平显著增高。多项研究表明,HCMV感染与胃癌、乳腺癌、结直肠癌、脑胶质瘤等多种肿瘤的形成与发展存在一定关系。HCMV感染细胞表达的即刻早期蛋白(Immediately early,IE)作为转录因子,调节病毒和宿主细胞基因的表达;HCMV衣壳蛋白65(tegument protein,pp65)作为一种免疫调节蛋白,帮助病毒逃避T细胞对感染细胞的识别和杀伤。然而HCMV感染与妇科肿瘤尤其是卵巢癌的关系目前研究较少。目的检测HCMV IE、pp65在上皮性卵巢癌和卵巢良性囊腺瘤组织中的表达情况;分析HCMV的表达与患者的年龄、初诊CA125水平、肿瘤组织病理类型、FIGO分期、术前新辅助化疗等一般临床特点的相关性;分析HCMV感染对EOC患者预后的影响。从而了解HCMV在上皮性卵巢癌发生发展中潜在的作用及机制,揭示HCMV感染对EOC患者预后的影响。方法本实验将以不同类型上皮性卵巢癌组织作为研究对象,选取同期手术切除的良性卵巢囊腺瘤组织作为对照。采用免疫组织化学染色的方法,从组织学水平检测HCMV IE、pp65在组织中的表达情况。采用SPSS 20.0统计软件进行统计学分析,卡方检验比较各组之间的差异,分析HCMV IE、pp65的表达与年龄、初诊CA125水平、肿瘤组织病理类型、FIGO分期、术前是否行新辅助化疗等一般临床特点的相关性;用Kaplan-Meier方法构建生存曲线,采用单因素、多因素Cox回归分析影响EOC患者预后的因素。结果1.HCMV IE、pp65蛋白在上皮性卵巢癌中的表达在66例上皮性卵巢癌组织中,82%组织切片中出现HCMV IE蛋白阳性表达,在30例对照组卵巢良性囊腺瘤标本中出现36%HCMV IE蛋白阳性表达;97%EOC组织切片中出现HCMV pp65蛋白阳性表达,在30例对照组卵巢良性囊腺瘤标本中出现63%HCMV pp65蛋白阳性表达。这两种蛋白主要在细胞核和(或)细胞质中表达。HCMV IE、pp65蛋白的表达与年龄、初诊CA125水平、肿瘤组织病理类型无明显相关性。2.HCMV IE、pp65蛋白表达水平与上皮性卵巢癌分期的关系本研究中,早期卵巢癌(FIGO I-II期)8例,晚期卵巢癌(FIGO III-IV期)58例。HCMV IE蛋白在25%(2/8)的I、II期EOC为广泛表达,66%(38/58)的III、IV期中出现广泛表达,晚期EOC组织细胞核及细胞质中有较高的HCMV IE蛋白表达,IE蛋白的染色强度随期别的升高而明显增强(P=0.0279)。HCMV pp65蛋白在38%(3/8)的I、II期EOC为广泛表达,64%(37/58)的III、IV期中出现广泛表达,虽然HCMV pp65蛋白在晚期EOC组织中广泛表达的比例较高,但无统计学差异(P=0.1537)。3.HCMV IE、pp65蛋白表达水平与术前新辅助化疗的关系本研究中,34例EOC患者进行了初次肿瘤分期手术及肿瘤细胞减灭术,32例患者在术前行新辅助化疗后进行中间型肿瘤细胞减灭术。研究发现,在32例术前行新辅助化疗的患者中,75%(24/32)表现为HCMV IE蛋白广泛表达,而在34例未行术前新辅助化疗的患者中,仅有47%(16/34)表现为广泛表达(P=0.0202),差异有统计学意义。虽然HCMV pp65蛋白在术前行新辅助化疗的患者中69%(22/32)表现为广泛表达,高于未行术前新辅助化疗的53%(18/34),但差异无统计学意义(P=0.1890)。4.HCMV IE、pp65蛋白表达水平与上皮性卵巢癌患者预后的关系使用Kaplan-Meier方法构建生存曲线,发现EOC患者中IE蛋白广泛表达组的总生存期OS显著短于局灶表达或阴性组,差异有统计学意义(39月vs.41月,P=0.03);pp65蛋白广泛表达组的OS短于局灶表达或阴性组,差异无统计学意义(40月vs.42月,P=0.37)。单因素分析显示,FIGO分期(P=0.024)和HCMV IE广泛表达(P=0.032)是EOC患者OS的影响因素;多因素Cox回归分析显示HCMV IE广泛表达(P=0.034)是EOC患者OS的独立危险因素。结论1.HCMV IE、pp65蛋白在上皮性卵巢癌和卵巢囊腺瘤中均有不同程度的表达,但在EOC组织中的表达水平明显高于卵巢囊腺瘤。2.HCMV IE、pp65蛋白在上皮性卵巢癌中的表达与年龄、初诊CA125水平、肿瘤组织病理类型无明显相关性。3.HCMV IE蛋白的广泛表达与EOC的肿瘤分期相关,晚期EOC组织的IE蛋白广泛表达率显著高于早期EOC。4.术前行新辅助化疗的EOC组织中HCMV IE蛋白的广泛表达率显著增高,新辅助化疗可能会重新激活肿瘤内潜伏的HCMV。5.FIGO分期和HCMV IE广泛表达是EOC患者OS的影响因素,其中HCMV IE蛋白的广泛表达是OS的独立危险因素。HCMV感染及IE、pp65蛋白表达与EOC的发生发展存在一定的关系,但HCMV感染对机体炎症反应及卵巢癌细胞生物学行为的影响是一个复杂的过程,其在上皮性卵巢癌中确切的肿瘤调控机制尚需进一步研究。