论文部分内容阅读
目的：骨质疏松(Osteoporosis, OP)是以单位体积内骨组织量减少、骨组织微细结构破坏、骨脆性增加为特点的一种系统性、全身性骨骼疾病。与OP相关的两种主要细胞是成骨细胞(osteoblast, OB)和破骨细胞(osteoclast, OC)。本文主要研究脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields, PEMFs)对OC、OB以及它们的前体细胞的影响。对PEMFs(?)台疗骨质疏松的机理进行初步探讨,为临床PEMFs应用提供依据。方法：一、脉冲电磁场对破骨细胞前体细胞和成骨细胞前体细胞的影响：1、离体PEMFs作用：分离8w龄雌性SD大鼠股骨骨髓细胞,体外培养过程中接受PEMFs作用。2、活体结合离体PEMFs作用：8w龄活体雌性SD大鼠去卵巢后接受PEMFs作用8w,分离股骨骨髓细胞进行体外培养,继续接受或不接受PEMFs作用。分别培养并观察各组CFU-F (fibroblast colony forming units,成纤维细胞集落形成单位)和CFU-GM(granulocyte/macrophage colony forming unit,粒/巨噬细胞集落形成单位)的克隆形成情况。二、脉冲电磁场对破骨细胞的影响：8w龄活体雌性SD大鼠去卵巢后,接受PEMFs作用8w,分离股骨骨髓细胞进行体外培养,继续接受或不接受PEMFs作用。对各组分别诱导培养破骨细胞,并进行抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase, TRAP)检测、整合素avβ3、NF-κB受体激活子(receptor activator of NF-κB, RANK)、组织蛋白酶K (cathepsin K)免疫细胞化学染色检测。三、脉冲电磁场对成骨细胞的影响：分离6w龄雌性SD大鼠股骨及胫骨骨髓细胞,诱导培养成骨细胞过程中离体PEMFs作用,进行NF-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand, RANKL)、细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)检测。结果：1、离体PEMFs作用时,CFU-GM克隆数减少,CFU-F克隆数增加；2、活体结合离体PEMFs作用时,剂量组的CFU-F均增加,而CFU-GM各组间均无显著差异。3、PEMFs作用后,OC数量明显减少；同时,免疫细胞化学染色显示OC也明显减少。4. PEMFs作用后,OB数量明显增多,OB体外分化能力明显增强。结论：1、离体PEMFs作用时,PEMFs对OC前体细胞有抑制作用。但活体结合离体PEMFs作用时,未见对OC前体细胞的抑制作用。2、离体PEMFs和活体结合离体PEMFs作用,对OB前体细胞增殖均有促进作用。3、PEMFs对OC的分化和功能有抑制作用,可以抑制OC与骨吸收有关的生物活性。4、PEMFs对OB的分化和功能有促进作用,可以促进OB活性。