鸡蛋中土霉素/四环素/金霉素残留的HPLC检测方法的研究

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四环素类抗生素是由链霉菌产生的一类广谱抗生素,主要有四环素(Tetracyline,TC)、金霉素(Chlotetracylcine,CT)、土霉素(Oxytctracycline,OTC),由于其广谱的抗菌活性和药动学特征而被广泛用来治疗畜禽疾病。四环素类药物除对革兰氏阳性和阴性菌有作用外,对立克次氏体、衣原体、支原体、螺旋体、放线菌和某些原虫亦有抑制作用,临床上主要用于大肠杆菌或沙门氏菌引起的下痢,如羔羊痢疾、仔猪黄痢和白痢、雏鸡白痢等;多杀性巴氏杆菌引起的牛出败、猪肺疫、禽霍乱等;支原体引起的牛肺炎、猪气喘病、鸡慢性呼吸道病等。金霉素还可用作饲料添加剂来预防动物疾病,提高饲料报酬,促进动物生长。 但另一方面由于一些养殖户为追求经济利益,违规长期超量使用,从而使药物在动物组织中残留,其直接后果是耐药菌株逐年增加,从而不仅使其疗效降低,也使得其他的抗生素的使用也受到了限制;另一方面,药物在动物性产品中的超标,也直接危害着人民的身体健康。四环素类药物能沉积于骨及牙组织内,与新形成的骨、牙中所沉积的钙相结合,导致牙齿持久成黄色,俗称“四环素牙”,使出生的幼儿乳牙釉质发育不全并出现黄色沉积,引起畸形或生长抑制。四环素类药物还在肝组织中富集,造成肝损害,还可造成过敏反应、二重感染、致畸作用。因此为了有效地监控四环素类药物的残留,必需建立起相应的检测监控手段和方法. 在国内报道的四环素类药物检测方法中,多以高效液相色谱法紫外检测器检测法,而且为畜禽组织中的检测方法较多,国内尚未有鸡蛋中四环素类药物残留的检测方法的报道。 本试验研究了鸡蛋中土霉素/四环素/金霉素残留的高效液相色谱法荧光检测方法。采用Oasis HLB柱来分离和提纯鸡蛋中的土霉素/四环素/金霉素,用反相高效液相色谱测定土霉素/四环素/金霉素,激发和发射波长分别是380nm和520nm。鸡蛋中土霉素/四环素/金霉素的检测限和定量限分别为10μg/kg、10μg/kg、15μg/kg和20μg/kg、20μg/kg、30μg/kg。鸡蛋中土霉素/四环素/金霉素在100、500、1000μg/kg的添加浓度范围内,土霉素的平均回收率在77.7%~,81.8%之间,变异系数范围在0.9%~2.8%(n=5)之间;四环素平均回收率在79.5%~81.0%之间,变异系数范围在1.0%~2.9%(n=5)之间;金霉素平均回收率在80.9%~83.5%之间,变异系数范围在1.7%~2.6%(n=5)之间。 研究结果表明本方法稳定可靠,完全能满足鸡蛋中土霉素/四环素/金霉素残留的测定。
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