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背景:四环素残留而引起的食品安全问题一直备受关注,然而,目前对于食品中四环素残留还没有极其便捷有效的快速检测方法。本研究探索了利用可逆加成-断裂链转移自由基聚合技术在纸基材料上可控构建可特异性识别四环素类抗生素的功能性分子印迹孔穴,制备出高选择性纸基印迹复合材料。方法:分别利用酶、酸或碱三种方法对猪皮和鱼皮来源的明胶进行水解,优化水解条件(温度、p H值和时间),研究水解明胶的相对分子量、等电点、蛋白变性温度等特征,确定水解明胶的最佳制备方案。通过单因素实验优化选择纸基原材料、罗丹明B浓度、溶剂、模板分子、功能单体、交联剂等,筛选出纸基分子印迹复合材料的最佳制备方案,并制备纸基复合材料。通过扫描电镜分析、红外光谱分析、静态吸附实验、动态吸附实验,分别考察最优方案所制纸基复合材料的表征性能及吸附性能;利用Scatchard方法分析纸基印迹材料的识别机理。将该纸基复合材料用于乳制品中四环素检测,分析其检出限及灵敏度。结果:经筛选得水解明胶的最优制备方案为,采用胶原蛋白酶在37℃、p H7.4下,酶解60 min。同时,分析了最优方案制备的水解明胶的基本性能,发现水解明胶的分子量在5万以下,其中主要氨基酸为异亮氨酸和胱氨酸,等电点为4.51,无热变性发生。经优化分析可得纸基复合材料的最优制备方案为,以撕开处理的A品牌A4打印纸为纸基材料,以0.1 mg/m L的罗丹明B溶液为荧光定量染色剂,以每1 mmol模板分子加入40 m L乙腈为溶剂,以四环素为模板分子,以8 mmol MAA+0.3 g水解明胶为功能单体,以28 mmol EGDMA为交联剂,模板分子洗脱时间为36 h。通过扫描电镜和红外光谱对最优方案制备的纸基复合材料进行表征分析,证实纸纤维表面成功合成了分子印迹聚合空穴。经等温吸附模型分析发现MIPs和NIPs的吸附容量在四环素浓度为200 mg/L时达最大值,分别为40.80和18.12mg g-1,印迹指数为1.912。分析纸基复合材料的吸附识别机理,发现纸基印迹材料MIPs与四环素之间的结合存在两种不同的结合位点。同时,该纸基复合材料对四环素具有特异性选择识别性能。将纸基复合材料用于测定市售乳制品中四环素残留,综合分析后在0.5-50mg L-1范围建立了标准曲线,检出限为0.48 mg L-1,本方法检测市售乳制品中四环素时未检出,通过对样品加标检测,得加标回收率在78.8%-104.1%。结论:研究表明加入水解明胶作为功能单体提高了纸基印迹材料对目标物四环素的特异性吸附能力,经最优条件合成的纸基印迹材料对四环素具有高选择性,纸基印迹材料MIPs与四环素之间的结合存在两种不同的结合位点,最大吸附容量可达到40.80 mg g-1,具有较强的特异性吸附性能。该纸基复合材料在四环素浓度为0.5-50 mg L-1具有较高的检出限和灵敏度,可用于畜禽产品中四环素类抗生素残留的快速、便捷、低廉、灵敏筛选检测。