解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens FZB42)中与线虫侵染相关的新致病基因的鉴定

来源 :云南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:t920215
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
线虫在自然界中分布广泛,繁殖速度快,对动植物的侵染给人类造成巨大的经济损失。目前在防治线虫病害中仍然广泛采用的化学农药由于高毒性、高残留以及抗药性等问题,使得以线虫病原微生物为基础的生物防治成为重要选择之一。在大量的有关线虫生物防治的研究中,现已证明杀线虫微生物在侵染线虫过程中的凝集素基因,胞外侵染性蛋白酶基因和几丁质酶基因等通过病原和宿主的相互识别、侵入或者杀死宿主参与侵染过程。定植于植物根部的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens FZB42)是一种具有显著促植物生长及抑制植物病害能力的革兰氏阳性芽孢杆菌。我们的生测实验也提示,它也具有强大的杀线虫活性。在解淀粉芽孢杆菌FZB42菌株全基因组测序完成的有利背景下,通过构建全基因组的随机突变文库,我们对该细菌参与线虫侵染相关的新致病基因进行了研究。   在前期构建了解淀粉芽孢杆菌FZB42随机突变文库的基础上,通过线虫生测实验,共计筛选了随机突变文库中的300个突变子,最终得到杀线虫活性减弱的5个突变子,然后通过反向PCR技术对其中一株突变子F5进行突变基因的克隆,初步拟定了3个候选的突变基因,分别是hypotheticalprotein(RBAM_007470),prkA(RBAM_009250)和yhdV(RBAM_009870)。最后对上述3个新的与线虫侵染相关的候选致病基因的其中一个通过回复突变的方法进行了验证,鉴定得出hypothetical protein(RBAM_007470)基因没有完全回复F5的突变性状,说明这个基因可能跟其它基因协同参与对线虫的侵染,或者只是一个不相关的随机突变。   本研究所取得的主要创新性结果包括:   1,通过线虫生测实验,从解淀粉芽孢杆菌随机突变文库的300个突变子中筛选出5个侵染线虫活性显著下降的突变子,分别为F5、E23、F21、F35以及B54。为鉴定在B.amyloliquefaciensFZB42中与侵染线虫相关的的新功能基因提供物质基础。   2,利用反向PCR技术,从侵染线虫能力明显降低的突变子F5中克隆出3个基因。分别为hypothetical protein(RBAM_007470),prkA(RBAM_009250)和yhdY(RBAM_009870),并确定利用反向PCR方法来克隆转座子插入的靶标基因的可行性。   3,对筛选到的与线虫侵染相关的新候选基因进行功能验证。构建了解淀粉芽孢杆菌的HP(hypothetical protein)基因的回复表达突变株,通过比较基因回复表达突变株与原始F5突变子的杀线虫活性,结果显示hypotheticalprotein(RBAM_007470)没有完全回复F5的突变性状,说明这个基因可能跟其它基因协同参与对线虫的侵染,或者只是一个不相关的随机突变。
其他文献
该论文的主要研究方向为"逻辑综合"中的"工艺映射"算法研究.
论文初步实现了一个基于TCP/IP协议的实时监控系统.该系统通过利用实时传输协议RTP实现了音频/视频的实时传输,并利用RTCP数据包实现了站点的管理(网管).RTP是IETF为解决IP网
线粒体是细胞内提供能量的细胞器,同时在活性氧自由基产生和调节细胞凋亡中也起着重要作用。线粒体DNA(mtDNA)突变与癌症相关性正日益受到广泛的关注。有研究报道线粒体功能的缺
系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎都是由基因和环境因素相互作用的、临床表现复杂的自身免疫性疾病。PTPN22基因编码淋巴酪氨酸磷酸酶(LYP),LYP通过与Src酪氨酸激酶C端(Csk)相互作
近年来,随着个人无线通信的迅猛发展,通信频率资源变得越来越紧张。这就导致了各种具有高频谱利用率而且宽带工作的通信体制如CDMA的兴起。这在客观上造成了信号发射时对功率放
有性杂交尤其是远缘杂交是百合育种的主要手段,而杂交不亲和及胚败育等是其主要障碍。离体授粉和胚拯救技术作为克服杂交受精前后障碍的有效手段,在百合育种工作中得到广泛应用
频率综合源是现代电子系统和通信系统中的核心部件之一,决定了所配置系统的多项性能指标。许多国家对于高性能频率源的设计非常关注,在理论研究和技术创新方面进行了巨大的投入
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
该文在分析总结以往的有脸检测算法的基础上,提出了静态图像中肤色和多个模板相结合的方法,在保证检测率的前提下以每幅小于1秒的速度完成静态复杂背景中的人脸检测.根据对现
该论文的设计工作来源于信息产业部重点科研发展项目,研究V5接口的硬件实现,共最终成果为设计研制V5接口专用芯片.论文首先介绍了接入网和V5接口的有关知识,然后在对V5接口协