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排卵是女性生殖过程中的一个必不可少的关键环节,是由促黄体生成素LH激发可受精的成熟卵泡从卵泡壁释放的一种复杂的多基因、多步骤参与的过程。在卵母细胞被释放的过程中,其周围的细胞外基质的水解和重组以及卵泡壁特定部位的局限性破裂成为卵母细胞得以顺利排出的关键性环节。基于具备上述类似炎症样反应的过程,排卵这种由LH激发的酶级联样反应涉及到很多炎症相关基因,尤其是在卵母细胞被释出出这一重要环节中编码蛋白水解酶的基因起着关键性作用,它们通过参与其中的细胞外基质的分解与合成这些重要的重组事件来调节排卵。ADAMs是近来发现的一类编码解整联蛋白金属蛋白酶的基因家族,ADAMTS-1是新发现的此家族中的一个成员,含有三个重复的血小板凝血酶敏感蛋白基序,被证实在炎症反应中起重要作用。
目的:探讨新发现的一种与炎症相关的金属蛋白酶ADAMTS-1(含血小板凝血酶敏感蛋白基序的解整联蛋白金属蛋白酶-1)在围排卵期小鼠卵巢中的表达及其基因的主要调节方式。
方法:取动情前期的C57/BL6雌性小鼠分两组,实验组通过每只分别腹腔注射促性腺激素孕马血清(PMSG)4IU和人绒毛膜促性腺激素(hCG)5IU(在注射PMSG48h后使用)诱发小鼠超排卵;拮抗组于促性腺激素(PMSG 4IU/HCG 5IU/只)处理过程中加用RU486(孕激素受体PR拮抗剂)1 mg/只灌胃,两组同时设立对照组。所有小鼠分别于HCG注射后2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、16 h、24 h、48 h、72 h颈椎脱臼处死,对照组于HCG注射时间处死。对所有小鼠双侧卵巢分别采用免疫组化对ADAMTS-1进行定位分析和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法进行围排卵期ADAMTS-1 mRNA动态表达水平的半定量分析。
结果:免疫组化试验发现实验组ADAMTS-1主要表达于卵巢表面大卵泡的颗粒细胞层;拮抗组则未见明显表达并可见HCG 16 h后发育正常的卵母细胞仍然滞留于卵泡中。RT-PCR检测方法发现,实验组ADAMTS-1 mRNA水平于注射HCG后2h开始被诱导后逐渐升高,到12 h达到高峰,此后开始下降,48 h后未见表达;拮抗组ADAMTS-1 mRNA水平则未见诱导。所有对照组均未见ADAMTS-1 mRNA的诱导和ADAMTS-1蛋白的表达。
结论:ADAMTS-1的一过性表达和PR诱导调节明显相关性表明ADAMTS-1可能在排卵中特别是卵母细胞释出中起重要作用。