乳腺癌肿瘤原发灶免疫细胞浸润与血行转移的相关性研究

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目的:通过对乳腺癌癌周侵袭边缘和癌灶中心免疫细胞(CD68+巨噬细胞、CD20+B淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞)的表达情况和外周血循环肿瘤细胞(circulating tumour cells, CTC)检出的分析,探讨两者之间的关系以及各自与乳腺癌的发病年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、激素受体状态等其他临床病理资料间的关系,了解乳腺癌肿瘤微环境的免疫状态,阐明炎症与肿瘤细胞侵袭入血的关系,预测和评估乳腺癌预后。方法:利用实时荧光定量PCR法联合多标志物细胞角蛋白19(cytokeratin19,CK19)、小粘蛋白(small breast epithelial mucin, SBEM)、乳珠蛋白(human mammaglobin, hMAM)检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的方法学平台,检测133例乳腺癌患者外周血CTC。同时使用免疫组化法检测125例浸润性乳腺癌肿瘤组织癌周侵袭边缘和癌灶中心CD68+巨噬细胞、CD20+B淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞的表达情况。分别分析外周血CTC检出与其他临床病理资料的关系;癌周侵袭边缘和癌灶中心的CD68+巨噬细胞、CD20+B淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞表达与其他临床病理资料的关系;外周血CTC检出与CD68+巨噬细胞、CD20+B淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞表达之间的关系。结果:133例乳腺癌患者外周血中CK19、SBEM、hMAM阳性率为30.1%(40/133)、10.5%(14/133)、14.3%(19/133),联合三标志物CTC检出率为39.8%(53/133);浸润性乳腺癌患者外周血CTC的阳性检出明显高于导管内癌组(P=0.003)。肿瘤原发灶癌周侵袭边缘CD68+巨噬细胞、CD20+B淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞表达较癌灶中心明显丰富(P=0.000)。在乳腺癌癌周侵袭边缘,巨噬细胞高表达与发病年龄≤45岁、ER阴性、PR阴性、Ki-67>14%、CK5/6阳性、三阴性亚型相关(P<0.05);B淋巴细胞高表达与激素受体阴性、CK5/6阳性、三阴性亚型相关(P<0.05);T淋巴细胞与HER-2过表达、Ki-67>14%、HER-2过表达亚型相关(P<0.05)。在乳腺癌原发灶癌灶中心,巨噬细胞高表达与Ki-67>14%、CK5/6阳性、三阴性亚型相关(P<0.05);B淋巴细胞高表达与激素受体阴性、CK5/6阳性、三阴性亚型相关(P<0.05)。乳腺癌肿瘤原发灶巨噬细胞、T淋巴细胞浸润与CTC阳性显著相关(P<0.05)。结论:实时荧光定量PCR法联合多标志物检测乳腺癌外周血CTC的方法学平台可靠稳定且检出率高;乳腺癌癌周侵袭边缘CD68+巨噬细胞、CD20+B淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞表达较癌灶中心明显丰富;肿瘤微环境中浸润的免疫细胞通过参与乳腺癌细胞的血行播散过程而影响疾病的进展和转归。
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