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猪圆环病毒(PCV)是一种无囊膜、共价闭合、单股环状DNA病毒,属于圆环病毒科,圆环病毒属。PCV包括PCV-1和PCV-2两个型,PCV-1对猪为非致病性的,PCV-2与猪的多种疾病综合征有关。PCV-2是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,但仅有PCV-2并不足以引发典型症状。本实验室在诊断PMWS的过程中,检测到一种新的病毒因子P1。P1是环状DNA,有648个核苷酸,部分与PCV-2ORF2高度同源。虽然现在对P1因子的生物学特性以及其与PCV-2的鉴别诊断上有了初步研究,但是有关其在动物体内的增殖规律、致病机理尚不清楚,需要建立P1感染模型来进一步研究。首先,建立了实时荧光定量PCR检测方法。根据P1因子的基因序列设计合成了一对引物和探针,通过对反应条件和反应体系的优化,成功建立了TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。该方法具有特异、灵敏、快速等优点,在101-108拷贝/μL之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.99以上,扩增效率在90%-105%之间。其次,对P1感染Balb/c小鼠的模型进行了研究。健康的Balb/c小鼠经腹腔注射P1细胞毒,通过比较体重增长率,检测P1对小鼠的直接影响；利用建立的实时荧光定量PCR结合ELISA方法、免疫组化技术,研究P1因子感染后Balb/c小鼠组织中病毒核酸含量的动态变化、P1因子抗体水平变化以及抗原在组织中的定位。体重增长率的结果表明,攻毒后第14d、21d,3次攻毒组的小鼠体重增长率明显小于空白对照组：ELISA方法在整个攻毒周期均检测到P1抗体；荧光定量PCR在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、膀胱、睾丸、脑、胸腺和胰腺中检测到病毒核酸；免疫组化技术在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、睾丸和胸腺中检测到阳性细胞。这些结果都表明P1感染动物模型构建成功。该动物模型的建立为进一步研究P1的致病性和致病机理奠定了基础。