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目的:观察氧化苦参碱(oxymatrine,OM)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的胰腺星状细胞(LTC-14细胞株)中对Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)通路中相关细胞因子的影响。其中包括:TLR4、髓样细胞分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核转录因子-kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)在基因和蛋白水平的表达变化。探讨OM治疗慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)纤维化的可能分子机制。方法:将LTC-14细胞株分为4个组,Control组,LPS组,OM+LPS组,OM组。Control组:加无血清无双抗的培养基培养3h。LPS组:加入含浓度为10μg/ml LPS的无血清无双抗的培养基孵育3h;OM+LPS组:先加入500μg/ml的OM在无血清无双抗的培养基中孵育30min,然后加入浓度为10μg/ml LPS继续刺激3h;OM组:单纯加入含500μg/ml OM的无血清无双抗的培养基孵育3h。该实验中应用到的实验方法(1)采用免疫荧光方法检测LTC-14细胞株TLR4的表达。(2)应用免疫细胞化学技术了解NF-κB在细胞浆和细胞核的表达。(3)利用Western Blot技术检测氧化苦参碱对LPS诱导的LTC-14细胞中TLR4、MyD88及NF-κB在蛋白水平表达的影响。(4)通过实时荧光定量PCR检测氧化苦参碱对LPS诱导的LTC-14细胞中TLR4、MyD88及NF-κB在基因水平的表达变化。(5)通过ELISA试验检测细胞培养基中TNF-α的蛋白水平。结果:与Control组相比,LPS组TLR4、NF-κB在mRNA和蛋白水平上表达量显著增加,同时OM+LPS组较LPS组表达显著下降,有统计学差异(p<0.05)。OM组较Control组对比,无统计学意义。通过免疫细胞化学技术可以观察到LPS组较Control组发生显著的NF-κB核内易位,OM+LPS组较LPS组,核内易位明显减少。OM也可以下调LPS诱导的细胞培养基中TNF-α的蛋白表达,MyD88mRNA和蛋白表达各组之间比较,无统计学差异。结论:对LPS诱导的LTC-14细胞TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达及NF-κB向核内易位抑制作用可能是OM治疗胰腺纤维化的机制之一。