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借助分子生物学技术寻找、检测数量性状基因的方法,目前主要有候选基因法、基因组扫描法。本文以ESR、PRLR、RYR1、FSHR四个基因作为候选基因,以及八号染色体上的9个微卫星进行猪产仔数分子标记研究。 1.初步确定了三个新的猪产仔数分子标记:雌激素受体基因ESR的第八外显子处的ESRB酶切位点、促卵泡生长激素受体基因的第七外显子的FSHRB酶切位点和猪八号染色体上微卫星SWR1101位点。 2.筛选出了较优的分子标记:进行多个分子标记效应比较研究,确定了有利于产仔数提高和不利于产仔数提高的分子标记。 有利于母猪产仔数提高而又不影响仔猪生长的分子标记有五个:ESR酶切位点的基因型BB、FSHRB酶切位点的基因型BB、PRLR基因位点的基因型AA、ESR基因酶切位点ESRB的基因型AA、RYR1基因位点的基因型BB。可提高猪每窝产仔数2.2头。 不利于母猪产仔数提高的分子标记,即用于淘汰母猪的分子标记有五个:ESR酶切位点的基因型AA、PRLR基因位点的基因型BB、FSHRB酶切位点的基因型AA、ESR基因酶切位点ESRB的基因型BB、微卫星SWR1101 基因型BD。 3.产仔数分子标记对仔猪生长不存在负效应:进行了分子标记产仔数与约17000头仔猪初生重和断奶重相关性研究,结果表明:产仔数分子标记不显著地影响仔猪生长性能,即对仔猪生长不产生负效应。 4.从分子遗传和解剖角度证实了“母猪子宫大产仔多”的传统观念:屠宰了参考家系F2代103头成年母猪,测定了卵巢重量、子宫重量、子宫容积、输卵管长度、子宫角长度,并比较分析了子宫卵巢大小、产仔数与基因多态的相关性。母猪携带高产仔数基因,其子宫卵巢较大,也证实了产仔数分子标记的可能性和合理性。 5.寻找到二个分子标记同时检测的简便快速有效的新方法:筛选出 了H个产仔数分子标记(RYRI与ESR、RYRI与ESRB)同时PCR-RFLPS 检测,这既降低了检测成本,又提高了检测的准确性和可靠性。它适用于 育种和生产中大规模检测。 6.猪产仔数分子标记在生产上得到了验证和应用:将这些产仔数分 子标记在长大母猪中进行辅助选择,其结果与大白母猪、二花脸母猪的情 况很相似。它们可用于产仟数的辅助选择。 7.八号染色体上 9个微工星位点(SW205、50086、SW709、SW268、 SW905、SWRI 101. SW1070、SW444、OPN)的等位基因频率、杂合度、 多态信息含量在长大母猪、二花脸母猪、大白母猪、参考家系FZ代(大 白x梅山)母猪中存在较大的差异。 兄基因位点O、FSHRA)在四个母猪群中不存在的PCRSSCP 多态性。基因酶切位点(ESR、ESM、ESRB、PRLR、RYRI、FSHRB) 的PCWotMys多态性在不同母猪群中存在,其等位基因频率差异较大。 本文从基因变异中筛选出猪产仔数分子标记,比较多个分子标记的效 应和基因间互作,从而确定有利于和不利于产仔数提高的分子标记。而且, 开展了在生产中验证分子标记的稳定性和可靠性、从分子遗传学和解剖学 角度证实产仔数分子标记存在的可能性和合理性、在方法上完善分于标记 分析技术等一系列完整的研究,为探讨猪产仔数分子标记辅助选择、影响 产仔数的遗传机理打下基础,同时为人类生育研究提供动物模型。