【摘 要】
：
目的:特异性细胞免疫应答在结核的病理反应中起重要作用。伴有HLA限制性的抗原提呈机制存在于细胞免疫中,具有不同HLA遗传背景的患者对不同的结核抗原多肽产生不同的反应。本研究通过结核患者HLA基因型的鉴定、利用化学合成结核特异性多肽检测结核患者T细胞反应,探究结核患者基因型与疾病的相关性,以及与提呈肽段的相关性。为获得低成本、制备简易的结核抗原刺激物(结核重组重叠肽蛋白),通过比较其与市面销售的化学
论文部分内容阅读
目的:特异性细胞免疫应答在结核的病理反应中起重要作用。伴有HLA限制性的抗原提呈机制存在于细胞免疫中,具有不同HLA遗传背景的患者对不同的结核抗原多肽产生不同的反应。本研究通过结核患者HLA基因型的鉴定、利用化学合成结核特异性多肽检测结核患者T细胞反应,探究结核患者基因型与疾病的相关性,以及与提呈肽段的相关性。为获得低成本、制备简易的结核抗原刺激物（结核重组重叠肽蛋白）,通过比较其与市面销售的化学合成结核肽对结核患者的检测结果,希望进一步证明生物合成的结核重组重叠肽蛋白在运用于结核检测中是否具有抗原转移现象。方法:1.利用重组质粒导入感受态细胞中进行生物合成结核重组重叠肽蛋白;发酵扩培得到变性包涵体蛋白,运用SDS-PAGE检测目标蛋白;在蛋白层析仪上进行蛋白纯化;运用高pH值、低尿素溶液复性结核重组重叠肽蛋白;送出公司鉴定结核重组重叠肽蛋白。2.化学固相合成多肽查阅序列后,送往公司制备。3.严格按照纳入和排除标准,筛选出符合条件的43例受试者,签署知情同意书后,收集一般信息资料,采集受试者肝素抗凝外周血约15ml,取10ml分离出PBMC,利用ROP-TB、结核肽刺激进行ELISPOT检测,另取1ml抗凝全血送往公司对受试者基因型HLAⅠ类（-A、-B、-C）、HLAⅡ类（-DRB1、-DQB1）进行高通量、高分辨率鉴定。结果:1.检测抗原生产制备:生物合成结核重组重叠肽蛋白在制备成本低、合成期间质量控制便捷,不涉及毒性物质产生的方面均优于化学合成结核多肽。2.HLA遗传背景与结核相关性:将43例结核受试者分为总体结核受试者组、性别组、地域组、民族组,各组表达人数大于10人的基因型与正常人对照组比较,比较差异具有统计学意义的基因型如下:（1）43例总体结核受试者:HLAⅠ-B*15、HLAⅠ-B*46、HLAⅠ-C*01、HLAⅠ-C*03、HLAⅠ-C*07、HLAⅡ-DRB1*04、HLAⅡ-DRB1*08、HLAⅡ-DRB1*12、HLAⅡ-DRB1*15、HLAⅡ-DQB1*03、HLAⅡ-DQB1*06;（2）25例男性基因型HLAⅠ-B*46、HLAⅠ-C*01;（3）18例女性基因型:HLAⅡ-DQB1*06;（4）25例大理地区基因型HLAⅠ-B*46、HLAⅠ-C*01、HLAⅡ-DRB1*08、HLAⅡ-DQB1*06;（5）18例常州地区基因型:无;（6）18例白族基因型HLAⅠ-C*01、HLAⅡ-DQB1*06;（7）23例汉族基因型:HLAⅠ-B*15,所有以上结果与正常人对照比较,P值均≤0.001,按照α=0.05水准,差异极具有统计学意义。3.在43例受试者中8条肽段中,T细胞反应对P5阳性反应率最高,其对应的基因型表达结果:HLAⅠ-A*02表达率为30.56%;HLAⅠ-B*46表达率为19.44%;HLAⅠ-C*01表达率为30.56%;HLAⅡ-DRB1*08表达率均为27.78%;HLAⅡ-DQB1*03表达率为36.11%。4.结核重组重叠肽蛋白ELISPOT与T-SPOT两种检测方法比较,P>0.05,按照α=0.05水准,证明结核重组重叠肽抗原作为检测试剂盒与市场金标准试剂盒检测结果一致。结论:1.结核患者部分HLA基因型分布与正常人基因型分布有显著差异。2.所有病人均有针对结核抗原的T细胞反应,但是不同的HLA遗传背景的病人其T细胞反应针对不同多肽。3.生物合成结核重组重叠肽蛋白比化学合成结核混合肽更适用于试剂盒生产。4.结核重组重叠肽蛋白没有抗原转移现象。
其他文献
穿孔等离子弧焊接在焊接中厚板时有着独特的优势,其电弧挺度大、电弧温度高、能量密度高,可以在不开坡口的情况下实现单面焊双面成形工艺,生产效率高。随板厚增加,大熔深穿孔等离子弧焊工艺窗口窄,可调裕度低,焊接过程中容易出现熔池液态金属飞溅、塌陷等问题,焊缝中相应出现气孔、烧穿等焊接缺陷。本文通过对大熔深穿孔等离子弧焊接熔池及电弧进行视觉检测,总结焊接电流参数窗口随工件厚度的变化规律与机理,验证“受控恒定
【目的】应用神经电生理检查方法评价糖调节异常患者空腹血糖受损、糖耐量异常、空腹血糖受损伴糖耐量异常以及糖尿病患者的周围神经功能状况,并分析糖调节异常患者与糖尿病患者的周围神经受累程度,为空腹血糖受损、糖耐量异常患者周围神经损害的早期诊断提供依据。【方法】收集就诊于云南省第二人民医院的糖调节异常(IGR)131例及糖尿病患者81例以及健康正常人66例。其中,空腹血糖受损(IFG)患者77例、糖耐量异
研究背景:淀粉样变性病是一种少见的全身性疾病,淀粉样物质可沉积于肾脏、心脏、皮肤等多个器官造成损伤,并继发于多种疾病,如浆细胞病、慢性炎症性疾病、基因突变等。指南表明已有36种人类前体蛋白与淀粉样变性有关,包括免疫球蛋白轻链(AL)、血清淀粉样蛋白A(AA)、转甲状腺蛋白(ATFR)等,发病机制相对复杂。AL型和AA型是目前最常见两种形式。淀粉样变性的临床表现因累及器官不同而复杂多样,如心力衰竭、
背景与目的:肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌,是全球第六大常见的癌症,也是癌症相关死亡的第二大主要原因。肝癌可以通过手术切除、肝移植、肝定向疗法和全身疗法进行治疗,但肝癌的3年生存率仅为12.7%,中位生存期为9个月。因此,深入研究HCC的发病机制,明确参与HCC发生发展过程的癌基因或抑癌基因,对HCC的诊断和治疗具有重要意义。线粒体转录
现代社会是一个高度媒介化的社会,媒介改变了人们的生存方式、感知方式和行为方式。早在电影出现时,学界就开始讨论艺术作品的机械复制及影像与文化语境相分离等人类感知方式改变的相关问题,而观看是人类思维的具体体现,并传递了人类的知识和文化模式。当下的社交媒体,突破了时间和空间的限制,拉近了人与人之间的距离,实现了个体作为创作主体对其日常生活影像的生产和传播,重构了人们的文化沟通方式和行为。本文聚焦社交媒体
目的:对比青年AMI患者和老年AMI患者的冠心病高危因素与冠脉病变特征,以了解青年人AMI的差异性。方法:根据入选排除标准收集2018年09月01日至2020年08月31日于云南省大理州人民医院心内科住院治疗且有完整资料的青年AMI患者94例(青年组),随机选取同时期住院治疗的老年AMI患者100例(老年组)。收集所选病例的全部资料,如姓名、年龄、冠心病相关的高危因素(家族史、体重指数、糖尿病史、
目的探讨昆明地区粪便培养阳性的细菌性腹泻患儿病原分布特征及药敏情况,了解其病原构成及耐药特征。方法采用回顾性研究的方法收集昆明地区2015年1月-2019年12月出现腹泻并且粪便培养阳性的283例患儿的临床资料及实验室结果,并将其病原及其药敏试验结果进行统计分析。结果1.273例细菌性腹泻患儿的流行特征:(1)年龄及性别分布粪便培养阳性的腹泻患儿273例,其中男性156例,女性117例,男女比例为
目的近些年来,关于胆红素在糖尿病部分慢性并发症的发生、发展中发挥一定作用的研究越来越多,但其在糖尿病心血管并发症中所扮演的角色并未明确。本研究将探讨2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化的临床特点,分析血清胆红素与颈动脉粥样硬化之间的关系,为临床诊疗提供新的观点。方法我们收集了2019年01月至2020年07月在大理大学第一附属医院内分泌科住院的213名2型糖尿病患者的临床资料,包括各种临床和实验室参数。纳
目的:研究不同层面的真腔、假腔、主动脉面积变化情况,对比分析急性期及亚急性期主动脉重塑情况。探讨急性期与亚急性期Stanford B型主动脉夹层患者行胸主动脉腔内修复术后主动脉重塑差异,分析主动脉重塑的影响因素。方法:回顾性分析2018年9月至2020月12月于大理大学附属医院普外二科住院并接受胸主动脉腔内治疗的39例Stanford B型主动脉夹层患者。收集基本信息:年龄、性别;吸烟史;合并症:
目的随着年龄的增加,中老年人的肌肉量逐渐减少,而胃肠恶性肿瘤患者摄入减少的同时以肌肉蛋白为主癌性消耗增加。双重作用下中老年胃肠恶性肿瘤患者肌肉减少症是影响患者康复的重要因素,本研究调查住院患者中老年胃肠恶性肿瘤患者肌肉减少症患病率,并结合术后指标进行相关因素的分析,为后续开展相关工作提供思路。方法选择我院收治的患者共255人(胃肠道恶性肿瘤患者167例,体检正常者88例),主要观察指标为骨骼肌指数