【摘 要】
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目的在这项实验中,通过在M1/M2型巨噬细胞诱导分化系统下共培养Treg和巨噬细胞,探讨了Treg对M1/M2型巨噬细胞极化的影响。方法选用适龄C57BL/6雌性小鼠,采用贴壁法提取腹腔巨噬细胞分化M1/M2型巨噬细胞,取脾磁珠分选CD4+T细胞并诱导分化Treg。在M1/M2型巨噬细胞分化条件下,Treg与巨噬细胞共培养,实验分为6组:M、M1、M2、Treg+M、Treg+M1和Treg+M2
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目的在这项实验中,通过在M1/M2型巨噬细胞诱导分化系统下共培养Treg和巨噬细胞,探讨了Treg对M1/M2型巨噬细胞极化的影响。方法选用适龄C57BL/6雌性小鼠,采用贴壁法提取腹腔巨噬细胞分化M1/M2型巨噬细胞,取脾磁珠分选CD4~+T细胞并诱导分化Treg。在M1/M2型巨噬细胞分化条件下,Treg与巨噬细胞共培养,实验分为6组:M、M1、M2、Treg+M、Treg+M1和Treg+M2组,用流式细胞仪(FACS)检测F4/80~+i NOS~+M1型巨噬细胞和F4/80~+CD206~+M2型巨噬细胞的表达;Realtime RT-PCR法检测IL-10、TGF-β1、Arg-1、i NOS的m RNA的表达;ELISA检测细胞上清中IL-10、TGF-β1的表达。结果FACS结果显示,与M1组相比,Treg+M1组中F4/80~+i NOS~+M1型巨噬细胞表达增高,与M2组相比,Treg+M2组中F4/80~+CD206~+M2表达降低;RT-PCR结果显示,与M1组相比,Treg+M1组中i NOS m RNA表达增加。Arg-1、IL-10、TGF-β1表达不明显。与M2组相比,Treg+M2组中Arg-1m RNA表达降低,i NOS、IL-10、TGF-β1表达不明显。ELISA结果显示,与M1组相比,Treg+M1组细胞上清液中IL-10、TGF-β1表达降低。与M2组相比,Treg+M2组细胞上清液中IL-10、TGF-β1表达降低。结论Treg细胞在体外可以影响M1/M2型巨噬细胞的分化,即纯化后Treg细胞促进M1型巨噬细胞的分化,抑制M2型巨噬细胞的分化。
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