核异常及微核对有丝分裂的影响

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核异常与微核已被广泛使用为基因组不稳性的标志。而核异常及微核对细胞有丝分裂的具体影响却并不清楚。为此,我们选取了表达H2B—GFP融合蛋白的致瘤性细胞HeLa和Hoechst33342染色的非致瘤性细胞MCF—10A,利用活细胞实时摄影技术,长时间考察细胞有丝分裂,从而研究核异常和微核细胞对有丝分裂的影响。我们发现在单核的HeLa细胞中有5.0%细胞出现核异常和4.5%的细胞具有微核。相对于正常单核HeLa细胞,核异常的HeLa细胞进入有丝分裂的比例下降16%,间期停滞的比例却升高了7倍;进入有丝分裂后,核异常细胞中期赤道板异常的比例由21%增长为28%。同时,核异常和微核细胞内的染色体分离异常比例分别升高了16%和22%,并且,核异常及微核细胞产生异常子细胞的比例也分别上升了27%和26%。但是,HeLa单核细胞有丝分裂的极数并不受核异常和微核的影响。利用荧光原位杂交技术与活细胞摄影相结合,我们发现核异常和微核细胞并不会导致更多有别于母细胞的非整倍体子细胞的产生。最后,核异常细胞有丝分裂的整个细胞周期长度与正常细胞相比有显著性的升高。与HeLa细胞不同,虽然MCF—10A细胞有5.5%的单核细胞核异常,但是其有丝分裂进程及结果的各个指标都没有受到影响。综上所述,核异常和微核对于细胞有丝分裂的影响是有丝分裂阶段特异和细胞特异的。
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