槲皮素对人大肠癌SW480细胞侵袭及转移作用的体外实验研究

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目的:探讨槲皮素对体外培养的人结肠癌SW480细胞侵袭及转移能力的影响。方法:观察不同浓度(5、10、20、40、80、160μmol/L)的槲皮素及阳性对照组5-Fu(50mg/L)在24、48及72小时对人结肠癌SW480细胞增殖的影响,分别在光学显微镜和电子显微镜下检测槲皮素对人结肠癌SW480细胞生长的影响;运用细胞计数试剂盒检测法(CCK-8)测定不同浓度槲皮素对人结肠癌SW480细胞生长的影响;使用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的情况;利用粘附实验检测各组细胞的粘附率;利用Transwell小室实验检测各组细胞侵袭运动的能力;通过明胶酶谱分析法检测各组细胞基质金属蛋白酶的分泌水平。结果:光学显微镜和电子显微镜下观察到经槲皮素处理的人结肠癌SW480细胞较阴性对照组细胞数量减少,部分细胞的体积缩小,细胞膜完整,胞浆浓缩,核染色质固缩,细胞核碎裂,形成凋亡小体;CCK-8法检测显示槲皮素对人结肠癌SW480细胞的增殖有抑制作用,且其抑制作用随着处理药物浓度的增加和作用时间的延长而增强;流式细胞仪分析结果显示,随着槲皮素处理浓度的增加,SW480细胞的凋亡率逐渐增高,不同浓度槲皮素作用72h的结果显示该药物能呈浓度依赖性地诱导SW480细胞凋亡,且主要将细胞阻滞在G2/M期;粘附实验证明槲皮素能明显抑制结肠癌SW480细胞的粘附能力,且随着药物浓度的增加,粘附率逐渐下降;Transwell实验证明槲皮素能明显抑制结肠癌SW480细胞侵袭及转移能力,且随浓度增加,抑制作用增大;明胶酶谱分析实验发现,槲皮素有抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9分泌的作用,且随着药物浓度的增加,分泌的基质金属蛋白酶逐渐减少。结论:在体外研究中,槲皮素能够有效抑制人结肠癌SW480细胞的生长增殖、粘附、侵袭和转移的能力,并呈时间和剂量依赖性;同时能够诱导结肠癌SW480细胞凋亡的发生,并阻滞细胞周期的进展。并且从分子水平上证明,槲皮素抑制SW480侵袭转移能力可能与其抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9分泌有关。所以槲皮素是一种潜在的抗结肠恶性肿瘤侵袭和转移的药物。
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