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第一部分：重组负显性K6W泛素腺病毒颗粒扩增纯化及滴度检测
目的：利用QBI-HEK 293A细胞扩增重组负显性K6W泛素腺病毒颗粒(RAd-K6W)、重组负显性K6W泛素．绿色荧光蛋白腺病毒颗粒(RAd-K6W／GFP)和野生型腺病毒颗粒，纯化并检测三者病毒滴度。
方法：利用QBI-HEK 293A细胞大量扩增病毒，待细胞出现细胞病理效应(cell pathology effect，CPE)时收集细胞，反复冻融3次取上清。通过连续和不连续氯化铯密度梯度离心去除细胞污染物和缺陷性病毒再进行透析，得到可以用于体内的病毒原液并检测病毒滴度。
结果：病毒感染QBI-HEK 293A细胞出现CPE， RAd-K6W和RAd-K6W／GFP组的细胞生长速度和病毒扩增速度均慢于空病毒载体组，RAd-K6W、RAd-K6W／GFP和空病毒载体最终滴度分别为1.44×108(ifu)／mL、1.41×108(ifu)／mL和2.07×109(ifu)／mL。
结论：RAd-K6W、RAd-K6W／GFP和空病毒载体均通过QBI-HEK 293A成功扩增，在扩增过程中K6W泛素可能起抑制QBI-HEK 293A增殖的作用。
第二部分：重组负显性K6W泛素-GFP腺病毒颗粒转染兔晶状体上皮细胞的观察
目的：建立兔后发性自内障模型，前房注射RAd-K6W／GFP病毒原液后观察，证明其可以成功转染兔晶状体上皮细胞并确定注射用量。
方法：取4只新西兰家兔行右眼超声乳化晶状体吸除术，术后切口水密缝合，前房分别注射含1uL、2uL、4uL、8 uL RAd-K6W／GFP病毒原液的稀释液0.5mL，48h后处死，分离囊膜在共聚焦显微镜下观察GFP表达。3只新西兰家兔术后前房注射含8uL RAd-K6W／GFP病毒原液病毒原液的稀释液0.5mL,分别在术后48h、7d、19d观察GFP表达情况。1只新西兰家兔术后双眼前房注射同等量RAd-K6W和空病毒载体，48h后分离囊袋用免疫印记法检测泛素表达量。
结果：前房注射48h后，GFP即明显表达，泛素表达量也明显上调。转染效率随病毒量增加而升高，8uL组转染效率约为90％～95％。RAd-K6W／GFP携带的GPF表达随时间改变：病毒前房注射48h后即表达明显；7d后大部分细胞表达GFP；19d后表达几乎消失。
结论：RAd-K6W／GFP可成功转染兔后发性白内障模型的晶状体上皮细胞，腺病毒携带的外源性基因只表达1～2w。
第三部分：K6W泛素对兔后发性白内障的影响
目的：形态学评价RAd-K6W对兔后发性白内障的影响。
方法：新西兰家兔24只随机分为4组，行双眼晶状体超声乳化吸除术，前房分别注射不同液量的RAd-K6W和空病毒载体稀释液0.5mL。另取2只术后注射世可平衡液作为空白对照。术后1d、3d、5d、7d、13d、15d散瞳后用裂隙灯拍照系统拍摄后囊膜浑浊情况，并采用POCOman软件进行半定量分析，并用非接触式眼压计检测眼压、评价角膜浑浊程度。
结果：第一组双眼PCO评分无统计学差异；第二组术后1d、3d、5d、7d双眼PCO评分无统计学差异，11d、15d有统计学差异；第三组术后1d、3d双眼PCO评分无统计学差异，5d、7d、11d、15d有统计学差异；第四组出现角膜内皮水肿，2w后逐渐恢复透明。角膜浑浊在3d、7d有统计学差异。眼压第3、7d双眼眼压有统计学差异，K6W组高于对照组；第1、11、15d双眼眼压无统计学差异。
结论：达到适当转染效率的RAd-K6W对兔后发性白内障有抑制作用。过量表达K6W泛素可导致角膜内皮水肿、眼压升高的毒性作用。
第四部分：K6W泛素对兔晶状体上皮细胞特征性蛋白表达的影响
目的：进一步观察RAd-K6W对兔晶状体上皮细胞特征性蛋白表达的影响。
方法：第三组新西兰家兔2只术后15d处死分离囊袋，用免疫印记法检测α-平滑肌肌动蛋白的表达；免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白的表达。
结果:RAd-K6W转染15d后增殖的晶状体上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白的表达较对照组下调。
结论:RAd-K6W抑制兔晶状体上皮细胞表达α-平滑肌肌动蛋白。