脂肪间充质干细胞对大鼠肝移植术后免疫抑制及其机制的研究

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目的:研究脂肪间充质干细胞抑制肝移植术后免疫排斥反应的效果及可能机制。方法:取SD大鼠分离培养ADMSCSs并鉴定其免疫表型。构建RNA干扰慢病毒载体转染ADMSCs阻断PD-L1,比较PD-L1表达差异。二袖套法建立大鼠供体-受体原位肝移植急性排斥反应模型,将模型分为A组:SD-Wistar原位肝移植术+术前7d输注生理盐水,B组:SD-Wistar原位肝移植术+术前7d输注ADMSCs,C组:SD-Wistar原位肝移植术+输注ADMSCs,输注时间为术前7d、术中、术后3d,D组:SD-Wistar原位肝移植术+输注慢病毒转染后,ADMSCs,输注时间同C组。检测各组大鼠肝移植术后肝功能、IL-2和IL-10差异,观察肝脏病理改变及肝细胞凋亡情况,对比各组肝脏组织Bcl-2和Bax表达差异。结果:成功分离培养出ADMSCs,慢病毒转染后ADMSCs中PD-L1mRNA表达明显降低。B组、C组肝移植模型大鼠间术后的ALT、AST和TBIL与另外两组对比的差异均具有统计学意义P<0.05),予以ADMSCs处理后B组和C组ALT、AST和TBIL水平显著低于A组和D组(P<0.05),D组ALT、AST和TBIL水平低于C组(P<0.05)。B组、C组大鼠肝移植模型血清IL-2显著低于A组和C组(P<0.05),IL-10显著高于A组和D组(P<0.05);D组大鼠肝移植模型血清IL-2显著低于A组(P<0.05),IL-10显著高于A组(P<0.05)。采用TUNEL法检测肝细胞调亡,三组大鼠的肝脏组织切片凋亡细胞数量依次A组>D组>B组、C组。A组、B组、C组和D组的凋亡指数分别为35.86±5.92、12.39±2.23、13.76±4.23和28.47±4.32。B组与C组大鼠肝移植模型术后Bcl-2表达显著高于A组和D组,D组Bcl-2表达高于A组(图5);B组与C组大鼠肝移植模型术后Bax表达显著低于A组和D组,D组Bax表达低于A组。结论:脂肪间充质干细胞可显著降低肝移植术后排斥反应,但其最佳注射时机和剂量量仍有待进一步研究,PD-L1通路可能在其抑制排除反应中起着重要作用。
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