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目的化疗药物抵抗导致乳腺癌患者化疗失败已成为一个问题。研究发现,PI3K/AKT/m TOR信号通路失调是机体产生耐药的原因之一,而雷帕霉素靶蛋白m TOR基因是该通路的关键基因。本研究旨在探讨紫杉醇联合m TOR抑制剂依维莫司对MCF-7/ADR耐药细胞株的治疗效果,并探讨其相关作用机制。方法乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR细胞培养于含10%胎牛血清、1000ng/ml阿霉素的RPMI1640培养基中,给予紫杉醇和依维莫司干预,1、MTT法分别检测紫杉醇和依维莫司作用细胞48h的IC50,根据IC50结果设置紫杉醇和依维莫司的浓度,MTT法检测联合用药的效果;2、流式细胞术检测各用药组作用于MCF-7/ADR细胞48h后细胞凋亡率;3、Western blot检测各组细胞中PI3K、m TOR、4EBP1、p-p I3K、p-AKT、p-m TOR和p-4EBP1蛋白的表达情况。结果1、MTT结果表明,紫杉醇和依维莫司抑制细胞增殖具有剂量依赖性,其紫杉醇IC50为9.59μg/m L,依维莫司IC50为32.582μg/m L。紫杉醇和依维莫司联合时抗增殖作用大于紫杉醇或依维莫司单独作用,组合指数均小于0.9。2、用药组MCF-7/ADR细胞出现凋亡现象,凋亡率与对照组相比差异有统计学意义((P<0.05)。紫杉醇联合依维莫司处理细胞,细胞出现凋亡现象最明显,凋亡率与对照组、紫杉醇组、依维莫司组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),紫杉醇和依维莫司联合作用与单独用紫杉醇处理相比,在诱导细胞凋亡时有协同作用。3、Western blot分析表明,紫杉醇和依维莫司处理导致细胞内PI3K、m TOR、4EBP1、p-p I3K、p-AKT、p-m TOR和p-4EBP1的表达水平下降。与单独用药相比,联合用药下降水平明显较单独用药剧烈,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.依维莫司能够增强紫杉醇对MCF-7/ADR细胞的影响,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,使细胞分裂停滞在S期。2.依维莫司增强紫杉醇对细胞的增殖抑制作用,主要是通过m TOR信号通路蛋白如m TOR、p-m TOR及其下游底物4EBP1的下调。