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【目的】观察癫痫发作后海马齿状回神经营养因子-3(Neurotrophin-3,NT-3)表达以及突触密度的变化,探讨这两者相关性及其在癫痫发作中的可能意义。【方法】成年SD大鼠40只,设实验组(大鼠24只)和对照组(大鼠16只)。实验组大鼠侧脑室内注射红藻氨酸(Kainic Acid,KA),建立颞叶癫痫模型,分别于注射6h、24h、48h、7d后断头取脑;对照组以生理盐水代替KA。用免疫组织化学法和免疫电镜法观察检测大鼠海马齿状回内NT-3的表达量及突触超微结构。观察在相同时间点上实验组与对照组之间的差异,用成组设计两样本均数t检验;观察在不同时间点上,组内数据的变化规律,用单因素设计方差分析;用sperman法分析观察期内NT-3表达变化与突触密度变化之间的相关关系。检验水准a=0.05。【结果】①免疫组织化学方法观察大鼠齿状回NT-3的变化发现,与对照组比较,实验组在6h、24h、48h及7d表达的NT-3阳性细胞数均有减少(实验组分别为192.00±27.70、89.67±14.21、47.33±8.99、113.17±21.28,对照组分别为254.60±44.90、238.80±12.03、259.40±10.21、241.8±19.90)(P＜0.01)。对实验组单因素方差分析发现,24h组(89.67±14.21)较6h组(192.00±27.70)减少(P＜0.01),48h组(47.33±8.99)较24h(89.67±14.21)减少(P＜0.01),7d组(113.17±21.28)较48h组(47.33±8.99)增多(P＜0.01)。实验组NT-3阳性细胞数呈下降趋势,于48h降至最低点,7d时有所上升。对照组单因素分析发现各时间组无明显差异性(P＞0.05);②免疫电镜实验结果发现,NT-3金颗粒可见于胞浆内,线粒体、树突、轴突及突触前后膜。与对照组比较,实验组在6h、24h、48h及7d等时间点上NT-3标记金颗粒数均有减少(P＜0.01)(实验组分别为9.08±1.58、4.89±0.72、2.89±0.40、6.84±0.80,对照组分别为16.49±1.87、16.28±1.62、16.61±2.11、16.50±2.40)。实验组经单因素方差分析处理发现,24h组(4.89±0.72)较6h组(9.08±1.58)减少(P＜0.01),48h组(2.89±0.40)较24h组(4.89±0.72)减少(p＜0.01),7d组(6.84±0.80)较48h组(2.89±0.40)增多(P＜0.01)。NT-3蛋白金颗粒聚集呈下降趋势,48h颗粒最少。7d时金颗粒表达有所上升。这一结果与免疫组化方法中观察到的结果相一致;③实验组的突触后膜较对照组厚,突触间隙增宽。齿状回突触密度:与对照组相比,实验组6h及7d组突触密度未见明显改变(P＞0.05),24h及48h组突触密度有所减少(P＜0.05)(实验组分别为4.46±0.82、3.75±0.58~*、3.04±0.46~*、5.06±0.69;对照组为5.03±0.96、5.07±0.52、5.09±0.87、5.05±0.95)。单因素方差分析结果显示,实验组大鼠齿状回突触密度,在癫痫发作后6h(4.46±0.82)～48h(3.04±0.46)逐渐减少,仅有48h(3.04±0.46)～7d(5.06±0.69)则增多(P＜0.01),突触密度呈先下降后回升表现。对照组间无明显差异性(P＞0.05);④实验组齿状回NT-3金颗粒的表达量与突触密度变化有正相关关系(r=0.536)。【结论】1.癫痫发作后大鼠海马内NT-3蛋白表达量先降后升,但始终低于正常水平,NT-3金颗粒可见于胞浆内,线粒体、轴突、树突及突触前后膜。2.癫痫发作后出现突触数量减少,然后逐渐恢复到对照组水平,这是突触重建修复的过程。3.NT-3与突触的密度改变有关,表明NT-3参与了突触的重建,与突塑的可塑性有关。