【摘 要】
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本文检测了HCC中MAGE-A1、-A3的表达情况；克隆肝癌组织MAGE-A3；对克隆的HCCMAGE-A3进行蛋白表达，制造抗体。观察MAGE-A3蛋白致敏树突状细胞(DC)活化的淋巴细胞对HCC细胞的体外杀
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本文检测了HCC中MAGE-A1、-A3的表达情况；克隆肝癌组织MAGE-A3；对克隆的HCCMAGE-A3进行蛋白表达，制造抗体。观察MAGE-A3蛋白致敏树突状细胞(DC)活化的淋巴细胞对HCC细胞的体外杀伤作用，确定MAGE-A3蛋白负载DC作为HCC疫苗的可能性。通过WesternBlot，用纯化的融合蛋白GST-MAGE-A3检测上述抗体，结果显示对应融合蛋白GST-MAGE-A3分子量59KD处有一条带，表明所纯化的IgG抗体有很高的特异性。
本文将致敏DC与淋巴细胞混合培养，检测最佳培养条件。以淋巴细胞为效应细胞，以肝癌细胞H4M、正常肝细胞为靶细胞，以多种效靶比放入96孔板中。用MTT实验测定效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。结果负载GST-MAGE-A3抗原的DC激活的CTL对肝癌细胞有明显的杀伤作用，显著高于正常肝细胞对照组。说明从人外周血中诱导的DC负载GST-MAGE-A3抗原后，激活的CTL在体外对肝癌细胞能产生高效的杀伤作用，为临床应用MAGE-A3蛋白疫苗治疗HCC奠定基础。
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