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目的:以壳聚糖(CS)为材料,合成染料木素修饰的壳聚糖衍生物(GEN-CS);以GEN-CS为载体材料,TAM为模型药物,三聚磷酸钠(TPP)为交凝剂,染料木素(GEN)为靶向配基,采用离子交联法构建靶向乳腺癌细胞的TAM纳米粒,进一步评价纳米粒的形态、粒径、Zeta电势、载药量及包封率,体外释放等;激光共聚焦显微镜观察细胞对纳米粒的摄取情况,采用MTT法比较载药纳米粒与游离药物对MCF-7细胞的增殖抑制作用。方法:利用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)催化反应,将GEN与CS通过丁二酸的双羧基进行偶联,得到GEN-CS载体材料,运用红外等技术对它的结构进行确证和表征。GEN修饰的CS分子中未酰化的氨基与离子交凝剂TPP在适宜条件下形成纳米粒,将TAM包载于纳米粒中。用透射电子显微镜(TEM)观察纳米粒形态;用马尔文ZS90粒度仪测其粒径大小和分布、电势;HPLC法测定纳米粒的载药量和包封率;采用恒温水浴振荡法考察纳米粒的体外释药。制备FITC标记的他莫昔芬壳聚糖纳米粒(TAM-CS-NPs)和TAM-GEN-CS-NPs,然后分别作用于MCF-7细胞,用激光共聚焦显微镜观察TAM-CS-NPs和TAM-GEN-CS-NPs在细胞内的摄入与分布。体外培养MCF-7细胞,通过MTT法测定染料木素修饰的壳聚糖纳米粒(GEN-CS-NPs)、TAM溶液、TAM-GEN-CS-NPs纳米粒悬液对细胞的增殖抑制率,并计算当细胞生长抑制率为50%时的所需药物浓度,即IC50值。结果:制备的GEN-CS载体材料中GEN基团的质量百分含量为1.16%,GEN-CS和CS红外谱图对比发现,新增的1600 cm-1、1456 cm-1为苯环的特征吸收峰,1668 cm-1为酰胺I带,这证实CS上成功接枝GEN。透射电子显微镜(TEM)观察纳米粒为圆形或类圆形,平均粒径为299.8 nm,PDI为0.181,Zeta电位为27.6 m V,载药量为14.02,包封率为85.77%,与TAM相比较,TAM-GEN-CS-NPs具有明显的缓释性能。MCF-7细胞与经FITC标记的TAM-CS-NPs和TAM-GEN-CS-NPs,共同孵育4 h(37℃),激光共聚焦显微镜观察证明肿瘤细胞对TAM-GEN-CS-NPs的摄取明显高于CS-NPs。经析因设计资料的方差分析,显示药物因素与浓度因素之间存在交互效应(F=31.04,P=0.000),即不同处理组对肿瘤细胞的细胞增殖抑制率随药物浓度的变化而变化。GEN-CS-NPs对MCF-7细胞有轻微的增殖抑制作用,且随着浓度的增加,抑制作用增强且具有显著性差异(P<0.05)。TAM、TAM-GEN-CS-NPs对MCF-7细胞均有抑制作用,且随着浓度的升高而增强;相同药物的浓度,作用相同的时间,TAM-GEN-CS-NPs对MCF-7细胞增殖抑制作用最强,GEN-CS-NPs最弱,具有显著性差异(P<0.05)。TAM、TAM-GEN-CS-NPs的IC50分别为18.21μmol/L、12.82μmol/L。结论:以GEN-CS为载体,采用离子交联法制备的TAM-GEN-CS-NPs形状为类圆形或圆形、粒度分布均匀、具有较高载药量和较好缓释性能;激光共聚焦观察结果初步显示,TAM-GEN-CS-NPs对MCF-7细胞具有靶向性;MTT结果显示TAM-GEN-CS-NPs对MCF-7细胞增殖抑制作用强,故TAM-GEN-CS-NPs有望成为一种潜在的乳腺癌靶向性药物载体。